【摘 要】
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目的:探讨静压力对ox-LDL诱导的血管平滑肌细胞(VSMCs)胆固醇跨膜转运的影响及其机制。 方法:原代培养大鼠主动脉VSMCs,取第4-10代与ox-LDL50μg/ml共孵育,用自行研制的压
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目的:探讨静压力对ox-LDL诱导的血管平滑肌细胞(VSMCs)胆固醇跨膜转运的影响及其机制。 方法:原代培养大鼠主动脉VSMCs,取第4-10代与ox-LDL50μg/ml共孵育,用自行研制的压力可调细胞培养箱以不同压力加压处理(0kPa、8 kPa、16kPa和24kPa),发现胆固醇含量减少最明显的压力16kPa后,再用16kPa处理不同时间(0min、5min、30min、60min、90min和120min)。油红O染色法及HPLC观察静压力对VSMCs荷脂的影响;用免疫印迹法检测caveolin-1表达与caveolin-1磷酸化情况;用荧光定量PCR检测ABC-AⅠmRNA转录水平。用下调caveolin-1磷酸化的药物SB203580干预静压力对VSMCs的caveolin-1磷酸化作用,再用油红O染色法及HPLC观察VSMCs胆固醇含量。 结果:静压力可以减少ox-LDL诱导的VSMCs胆固醇含量,上调caveolin-1的磷酸化及ABC-AⅠmRNA转录水平;其中16kPa时,VSMCs caveolin-1磷酸化与胆固醇含量减少最明显,ABC-AⅠmRNA转录水平也达到最大值;而随着压力增高,胆固醇含量有所增高,caveolin-1磷酸化及ABC-AⅠmRNA转录水平有所降低。时效上,60min后caveolin-1磷酸化最明显。SB203580可显著抑制caveolin-1磷酸化,从而导致VSMCs胆固醇含量增加。 结论: 1、静压力可抑制ox-LDL诱导的平滑肌细胞胆固醇蓄积。 2、静压力抑制ox-LDL诱导的平滑肌细胞胆固醇蓄积可能与caveolin-1磷酸化及ABCA-ⅠmRNA转录水平升高有关。
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