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目的1.研究抗氧化剂还原型谷胱甘肽(GSH)对多柔比星(DOX)处理人肝癌细胞株HepG2增殖及凋亡的影响;2.探索NF-κB p65、bcl-2在多柔比星单药及联合GSH诱导HepG2细胞凋亡后的表达及其意义。方法1.采用MTT法,检测不同浓度DOX单药及联合GSH,对HepG2细胞生长的影响。2.流式细胞仪检测DOX2μg/ml、及DOX2μg/ml联合GSH100μg/ml处理人肝癌细胞株HepG224h后,观察细胞凋亡率。3.实时荧光定量PCR法检测不同浓DOX单药及联合GSH100μg/ml作用于HepG2细胞后NF-κBp65mRNA表达。4.Western blotting检测DOX2μg/ml、及DOX2μg/ml联合GSH100μg/ml处理人肝癌细胞株HepG224h后NF-κB p65及Bcl-2的表达。数据处理:用SPSS19.0对实验数据进行方差分析,各组间均数两两比较采用SNK-q检验进行统计学分析。结果1.MTT法测定生长抑制率:(1)DOX浓度为0.125μg/ml、0.25μg/ml、0.5μg/ml、1μg/ml、2μg/ml时,作用24h、48h、72h均能抑制HepG2细胞的增殖;上述不同浓度DOX分别和GSH(100μg/ml)联合,作用24h、48h、72h也能抑制HepG2细胞的增殖,但各组抑制率均较DOX单药有降低。DOX单药组、DOX联合GSH组的抑制率都具有时间剂量依赖性,且相同药物浓度下不同时间点两组间抑制率有统计学差异(P<0.05);在相同时间点下不同浓度两组间抑制率有统计学差异(P<0.05);(2)DOX单药组抑制率高于DOX联合GSH组,两组具有统计学差异(p<0.05)。2.流式细胞仪检测DOX2μg/ml、及DOX2μg/ml联合GSH100ug/ml处理HepG2细胞24h后,观察细胞凋亡率。对照组细胞凋亡率为(0.733±0.153)%,多柔比星单药组细胞凋亡率为(28.400±0.007)%,联合组细胞细胞凋亡率为(15.500±0.006)%;DOX组、DOX+GSH组分别与对照组相比,具有统计学差异(P<0.01);DOX组与DOX+GSH组相比,具有统计学差异(P<0.01)3.实时荧光定量PCR结果显示,DOX单药组、DOX联合GSH组处理HepG2细胞24h后,两组NF-κB p65mRNA表达具有统计学差异(P<0.05)。4. Western blotting结果显示: DOX2μg/ml、及DOX2μg/ml联合GSH100μg/ml处理HepG2细胞24h后,DOX2μg/ml、及DOX2μg/ml联合GSH100μg/ml处理HepG2细胞24h后, NF-κB p65:DOX组表达较对照组增高,DOX+GSH组表达较DOX组表达增高。DOX组、DOX+GSH组分别与对照组相比,具有统计学差异(P<0.05);DOX组与DOX+GSH组相比,具有统计学差异(P<0.05)。Bcl-2:DOX组表达较对照组增高,DOX+GSH组表达较DOX组表达增高。DOX组、DOX+GSH组分别与对照组相比,具有统计学差异(P<0.05);DOX组与DOX+GSH组相比,具有统计学差异(P<0.05)结论还原型谷胱甘肽与多柔比星联合使用,会导致多柔比星化疗效果下降,其机制可能是通过进一步上调NF-kb p65和Bcl-2的表达实现的。因此,使用多柔比星化疗的肿瘤患者应避免同时使用还原型谷胱甘肽。