红花注射液由红花Carthamus tinctorius L.经水煮醇沉等工艺加工而成，具有活血化瘀的功效，主要用于治疗冠心病、脉管炎、闭塞性心脑血管疾病，临床疗效显著。目前对红花注射液的研究多集中于药理、毒理及临床方向，活性成分研究主要针对羟基红花黄色素A，其它物质基础研究薄弱。本课题组前期研究表明：总黄酮与红花黄色素类为红花注射液中主要活性成分，其它成分未见活性研究报道，因此有必要对相应活性成分进一步深入研究。结合前期研究结果，采用多种分离分析方法（聚酰胺、Sephadex LH-20、ODS、HPLC和LC-MSn等）并结合相关的药理模型，对红花注射液中黄酮等化学成分进行了较为系统的研究，初步阐明了其中的抗血小板聚集活性成分。醌式查尔酮类成分活性好，但含量较低、稳定性较差、不易分离，我们建立了该类成分的指纹图谱，以便更好地控制红花注射液的产品质量，并对其中4个特征色谱峰进行了指认。依据体外抗ADP诱导血小板聚集活性结果，建立了同时测定红花注射液中3种活性成分含量的方法。具体研究内容如下：1.对红花注射液进行了分离纯化，从中分离得到16个化合物，经核磁、质谱等谱学方法鉴定其结构分别为：野黄芩苷（1）、山柰酚-3-O-β-芸香糖苷(2)、羟基红花黄色素A (3)、芦丁(4)、香豆酸(5)、腺苷(6)、紫丁香苷(7)、(3E)-4-（4’-羟基苯基）丁-3-烯-2-酮(8)、(8Z)-癸烯-4,6-二炔-1-O-葡萄糖苷(9)、对羟基苯甲醛(10)、(2E,8E)-十四烯-4,6-二炔-1,12,14-三羟基-1-O-葡萄糖苷(11)、山柰酚-3-O-β-槐糖苷(12)、尿苷(13)、二氢红花菜豆酸(14)、肉桂酸(15)和山柰酚(16)。化合物1，2，7，9，11，12均为首次从红花注射液中分到。2.体外家兔抗ADP诱导血小板聚集活性测试结果表明，除了化合物5外，其它化合物均表现出不同程度的抗血小板聚集活性，尤其是化合物2，3，9，12均与红花注射液抗血小板聚集活性测定结果相近。3.基于红花注射液现行质量标准，我们通过对红花注射液进行前处理，采用HPLC-UV法分离，将红花注射液色谱图导入到国家药典委员会《中药色谱指纹图谱评价系统》软件（2010年版）中，进行色谱峰匹配，建立了红花注射液中醌式查尔酮类成分指纹图谱，图谱中显示13个共有峰，通过液质联用在线分析，确定了4个化合物的结构并进行了裂解途径的推测。同一厂家的9批红花注射液指纹图谱分析结果表明，各批次红花注射液中醌式查尔酮类成分无论是种类还是含量均没有显著差异，这表明红花注射液生产工艺相对稳定。所建立的指纹图谱可以初步了解红花注射液中醌式查尔酮类成分组成情况，可以作为检测红花注射液质量的一种方法。4.分离得到的单体化合物抗血小板聚集活性结果表明，(8Z)-癸烯-4,6-二炔-1-O-葡萄糖苷(9)与紫丁香苷(7)活性较好，而且含量高。在现有质量标准中，仅对羟基红花黄色素A单一指标进行含量测定，在此基础上，采用HPLC-UV建立了同时测定红花注射液中羟基红花黄色素A、紫丁香苷以及(8Z)-癸烯-4,6-二炔-1-O-葡萄糖苷3种活性成分含量方法，并对9批成品进行了含量测定，发现3种活性成分含量没有显著性差异。该方法简单方便、科学合理，可为红花注射液质量标准的进一步提高与完善奠定基础。