温化蠲痹方对胶原诱导性关节炎大鼠滑膜细胞凋亡影响的研究

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目的:  研究中药温化蠲痹方对胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠外周血Th1/Th2细胞平衡的影响,及诱导滑膜细胞凋亡的作用,探讨温化蠲痹方治疗CIA大鼠的作用机制。  方法:  选用健康雄性Wistar大鼠,随机分为造模组、正常对照组(10只,简称正常组),造模组采用牛Ⅱ型胶原乳剂于大鼠尾根部注射,建立CIA模型。再把造模组随机分为模型组(10只)、MTX组(10只)、温化蠲痹方组(10只,简称中药组)。正常组、模型组灌胃生理盐水,中药组和MTX组分别灌胃温化蠲痹方和MTX混悬液。给药30天后,分别取大鼠血清、滑膜等标本,运用透射电镜和流式细胞术检测滑膜细胞凋亡,运用酶联免疫吸附法(ELISA)检测外周血Th1/Th2细胞平衡。  结果:  1.与正常组比较,模型组大鼠体重增长缓慢(P=0.000);治疗后与模型组比较,中药组、MTX组大鼠体重增长明显(P=0.002;P=0.002),中药组和MTX组之间差异无显著性(P=0.225;P=0.912);与治疗前比较,中药组和MTX组大鼠体重增长明显(P值均为0.000)。  2.与正常组比较,模型组大鼠足趾明显肿胀(P=0.000);治疗后与模型组比较,中药组和MTX组大鼠足趾肿胀明显减轻(P值均为0.000),而中药组和MTX组间比较差异无显著性(P=0.166;P=0.241);与治疗前比较,中药组和MTX组大鼠足趾肿胀度明显减轻(P=0.000)。  3.透射电镜显示,中药温化蠲痹方组大鼠滑膜细胞凋亡较模型组大鼠滑膜细胞凋亡明显。  4.流式细胞术检测显示,与正常组比较,模型组大鼠滑膜细胞凋亡率明显降低(P=0.01);与模型组大鼠比较,中药组和 MTX组大鼠滑膜细胞凋亡率明显升高(P=0.004;P=0.008),中药组和MTX组之间差异无显著性(P=0.258);  5.与正常组比较,模型组大鼠外周血 IFN-γ/IL-4比值明显升高(P=0.000);与模型组比较,中药组和MTX组大鼠外周血IFN-γ/IL-4值明显降低(P值均为0.000),两组之间比较差异无显著性(P=0.642)。  结论:  CIA大鼠外周血Th1/Th2细胞亚群失衡,滑膜细胞凋亡减少。温化蠲痹方可改善CIA大鼠关节滑膜炎症,可能通过恢复CIA大鼠外周血Th1/Th2细胞平衡及诱导滑膜细胞凋亡,达到对CIA大鼠的治疗作用。
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