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野生稻长期处在野生状态中,经受了各种灾害和不良环境的自然选择分化,产生了不同程度的抗逆性,60%的野生稻具有抗虫特性。昆虫选择植物寄主首先要寻找、定位并识别寄主,植物精油在此过程发挥着重要的作用。本论文主要以药用野生稻为材料,研究其释放的精油对寄主害虫褐飞虱和非寄主害虫亚洲玉米螟的忌避与拒食行为干扰作用;采用气质联用(CC-MS)技术对药用野生稻精油化学成分进行了分析;应用气相色谱和触角电位联用(GC-EAD)技术鉴定精油成分中具有电生理活性的有效组分:测定了药用野生稻的生理生化特性,以求最终阐明药用野生稻的抗虫机理。主要研究结果如下:
应用四臂嗅觉仪分别测定了褐飞虱在精油处理与敏感对照、空白对照中的嗅觉行为。结果表明:褐飞虱均趋向对照,药用野生稻精油对其有驱避活性。
采用“H”型装置测定精油对褐飞虱的行为选择影响。在精油处理与敏感对照中,随精油浓度的增加驱避活性呈“波浪状”特征,浓度为1μg/μL时,驱避率达最大值56.76%。而在精油处理与空白对照中,随精油浓度的增加驱避率呈直线增加态势,浓度为5μg/μL时,驱避率达最大值82.10%。结果表明,空白对照能消除敏感对照精油对褐飞虱的影响并最终正确反映精油的驱避活性。
采用液体饲料法测定精油对褐飞虱的拒食活性。在精油处理与敏感对照中,由于取食前的驱避作用影响导致拒食活性与处理浓度也呈现出“波浪状”拒食效应。浓度1μg/μL时,拒食率达最大值79.40%。在精油处理与空白对照中,拒食率与精油处理浓度呈正相关,浓度5μg/μL时,拒食率达最大值85.04%。
采用蜜露斑面积法测定了精油对褐飞虱的拒食作用。结果表明,拒食率与处理浓度呈正相关。浓度为5μg/μL时,拒食率达最大值67.37%。药用野生稻精油处理24h后对褐飞虱的拒食中浓度AFCso为1.84μg/μL。
应用行为选择室测定精油对非寄主害虫亚洲玉米螟的行为选择影响。结果表明,非寄主植物药用野生稻的精油对亚洲玉米螟产生明显驱避活性,精油浓度为2μg/μL时,驱避率达最大值76.47%。但当精油的浓度较大为5μg/μL时又会对亚洲玉米螟的嗅觉产生屏蔽作用干扰其作出行为选择而引起未响应率的增加和驱避率的减小;精油浓度最大5μg/μL时,驱避率降到65.63%。
采用饲料柱法测定了精油对亚洲玉米螟的非选择拒食活性。拒食率随精油浓度增加而增加,浓度最大5μg/μL处理12h后的拒食率为57.95%;24h后的拒食率为67.50%;处理12h和24h后的AFC50分别为3.10ng向g和L79~g/mg。
应用GC/Ms对药用野生稻和二白矮敏感水稻精油的化学成分进行了比较研究,共检测出74种化学成分。发现不同水稻材料的化合物在含量和组成方面存在明显差异。例如:糠醛在药用野生稻中含量为7.60%而在敏感水稻中未检出;2,3一苯并二氢呋喃在药用野生稻中含量为lO.80%而在敏感水稻中为3.32%;4-L烯基-2-甲氧苯酚在药用稻中高达为22.99%而在敏感水稻仅有7.32%。这些化合物可能与药用野生稻的抗性有关。
应用气相色谱和触角电位联用技术(GC-EAD)测定亚洲玉米螟对成虫对药用野生稻精油中各组分的电生理反应。初步分析认为,在精油组分里有7种具有电生理活性的物质。
比较测定了药用野生稻和敏感水稻二自矮的生理生化特性。结果表明,药用野生稻的氨基酸、还原糖含量低于二白矮;脯氨酸含量、超氧化物歧化酶以及过氧化物酶活性均高于二白矮。
结合上述研究,本文总结讨论了药用野生稻精油对寄主和非寄主害虫的忌避与拒食的研究方法,并结合结果,分析讨论了药用野生稻抗虫生理生化机理,可为今后的相关研究提供参考。