【摘 要】
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植物常受到低温胁迫的伤害,ICE1在植物低温胁迫响应中起到重要的作用,但其作用机制研究仍然有限。本研究在实验室克隆枳PtrICEl基因并获得转基因烟草的基础上,分析了转基因植
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植物常受到低温胁迫的伤害,ICE1在植物低温胁迫响应中起到重要的作用,但其作用机制研究仍然有限。本研究在实验室克隆枳PtrICEl基因并获得转基因烟草的基础上,分析了转基因植株的抗寒性及其可能机制。主要结果如下：1.对两个T2代转基因烟草株系(OE22和C12)0℃处理24h,发现转基因植株抗寒性增强,表现在萎焉减轻,电导率低于野生型(WT)。组织化学染色显示,WT积累更多的H202和02-。酶活性分析表明,两个转基因系POD.CAT.SOD酶活性均高于WT。2.转基因烟草和WT在0℃处理24h,利用高效液相色谱法检测多胺,结果显示转基因烟草中腐胺、亚精胺及精胺含量明显高于WT。RT-PCR结果显示,转基因植株中ADC1、ADC2基因的表达量在受到低温胁迫后比WT上升显著。常温条件下,采用5mM ADC抑制剂处理转基因植株处理后,降低其抗寒能力。利用酵母双杂交和BiFC证明枳PtrICE1与PtADC之间存在互作。3.RT-PCR鉴定得到RNAi-PtrICE1基因转化枳的S13和S17两个阳性株系,S13、S17和WT-4℃处理24h发现,干涉系所受到的伤害大于WT,电导率明显高于WT,组织化学染色显示,S13和S17两个干涉系植株比WT积累更较多的H202和02-
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