灰葡萄孢(Botrytis cinerea)引起的灰霉病是草莓生产上的主要病害之一。浙江省作为我国重要的草莓栽培地区,灰霉病发生严重。目前,化学防治是防治灰霉病常用且有效的措施之一,但随着杀菌剂频繁使用和剂量的增加,灰霉病菌已对多种杀菌剂产生抗药性。本研究对浙江省7个地区645株灰霉菌株进行抗药性检测和环酰菌胺抗性机理的研究。研究发现：①杀菌剂多菌灵、嘧霉胺、异菌脲和嘧菌酯的抗性菌株比例为65.66%-82.76%,4者的多药抗性类型比例达55.41%,而咯菌腈和啶酰菌胺的抗性菌株比例较低,分别为5.93%和0.95%。②Cyt b(嘧菌酯作用靶标蛋白)上的点突变G143A是引起灰霉菌株对嘧菌酯产生抗性的原因,被检测的嘧菌酯抗性菌株均含G143A,而敏感菌株都不含。③灰霉存在较低比例(11.6%)的环酰菌胺自然抗性菌株。甾醇3-酮还原酶(Erg27,环酰菌胺作用靶标蛋白)上的点突变可以引起灰霉菌株对环酰菌胺的抗性。在环酰菌胺抗性菌株中我们发现了7个新点突变,其中62株(83.8%)抗性菌株同时含有P57A和A378T点突变。通过基因转化研究发现,这两个点突变与灰霉菌株对环酰菌胺的抗性相关。本研究结果对指导草莓栽培农户合理用药和制定有效的防治策略具有实践指导意义,而且对杀菌剂抗性治理和新药的开发奠定了一定的理论基础。