此前，国内外未见鹅白细胞介素-18(GIL-18)的研究报告，GenBank上未有鹅IL-18基因序列。本研究目的是克隆鹅IL-18基因、构建鹅IL-18基因原核、真核表达质粒，制备重组鹅IL-18免疫血清，为研究鹅IL-18的生物学活性等奠定基础。 通过对GenBank中的鸡、鸭IL-18基因序列和已克隆的广东马冈杂交鹅IL-18基因中间333bp序列进行分析，设计上、下游引物各3条，组合进行RT-PCR鹅IL-18全基因的试验，先后成功扩增、克隆广东马冈杂交鹅、广东清远杂交鹅和广东阳江杂交鹅IL-18全基因序列642bp。序列测定和分析结果表明：三个杂交品种鹅的IL-18全基因序列642bp都相同，含一个603bp的开放阅读框架，编码200个氨基酸的IL-18前体蛋白，分子质量23-2ku，N端30个氨基酸为前导蛋白，其余170个氨基酸为功能蛋白，在动物中与鸭IL-18基因的核苷酸和推导氨基酸相似性都最高，前者96.5％，后者95.5％。 根据克隆的鹅IL-18基因，设计一对带酶切位点的特异性引物，经PCR扩增获得鹅IL-18基因ORF片段，将该片段插入原核表达载体pET32a(+)，获得重组原核表达质粒pET-GIL-18。转化大肠杆菌BL21，阳性菌在IPTG诱导下，重组质粒pET-GIL-18以融合蛋白GIL-18-His·Tag形式进行表达。SDS-PAGE结果显示，融合蛋白约为40ku，与预期结果相一致。Western Blot检测结果表明，融合蛋白能与鼠源抗6×组氨酸单抗发生免疫反应。将表达菌体超声破碎裂解后，SDS-PAGE检测显示，融合蛋白主要以包涵体形式存在。用His Trap FF crude柱子纯化表达蛋白，得到了纯度较高的GIL-18-His·Tag融合蛋白。以纯化的原核表达蛋白为抗原免疫兔子，制备兔抗鹅IL-18多克隆抗体。 本研究首次克隆了鹅IL-18基因，通过克隆多个品种鹅IL-18基因对该序列的准确性进行了验证，并在GenBank注册了第一条鹅IL-18基因序列，登录号为EFl59728；成功构建了鹅IL-18基因的原核表达质粒pET-GIL-18，优化了表达条件，制备了兔抗重组鹅IL-18蛋白多克隆抗体，为重组鹅IL-18蛋白的生物学活性、应用、单抗的制备等进一步研究奠定了基础。 另外，还构建了鹅IL-18基因真核表达质粒pcDNA-GIL-18，为其表达及应用研究奠定了基础。