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副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis，HPs)是革拉瑟氏病(Glassers disease)的病原菌，能引起猪以纤维素型性多发性浆膜炎、关节炎和脑膜炎为特征的全身性疾病。本病主要感染5—8周龄的仔猪，死亡率较高。随着我国养猪业集约化、规模化的发展，目前该病已经成为引起保育猪死亡的主要疾病之一，给养猪业带来了巨大的损失。
副猪嗜血杆菌在实验室分离培养比较困难，生长条件苛刻，对营养要求较高。本次研究从临床送检的病料中分离到8株副猪嗜血杆菌，并对其进行了生长特性、生化鉴定、药敏试验的测定。通过对分离株进行生化鉴定、动物回归试验等进一步确定分离株为副猪嗜血杆菌。生长试验结果表明：副猪嗜血杆菌在加入生长因子烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD，又称辅酶Ⅰ)和小牛血清的胰蛋白胨大豆琼脂培养基(TSA)和胰蛋白胨大豆肉汤培养基上生长良好。药敏试验结果表明：8株分离株对头孢类及磺胺类药物最为敏感，对环丙沙星、氯霉素、四环素、妥布霉素、乙酰螺旋霉素等具有耐药性。中药药敏试验结果表明：副猪嗜血杆菌对单味中药中的金银花、鱼腥草、野菊花、板蓝根敏感，同时也对由黄芩、金银花、连翘等组成的复方敏感。
本研究根据GenBank上发表的副猪嗜血杆菌16S rRNA基因设计一对特异性PCR引物。建立了一种快速、简便、灵敏性高、特异性强的PCR检测方法。PCR扩增片段大小为822bp，对该方法进行特异性和灵敏性等评价。试验结果表明：用该引物对巴氏杆菌、大肠杆菌、沙门氏菌、胸膜肺炎放线杆菌、副鸡嗜血杆菌进行PCR扩增均不能扩增出任何条带，该方法具有较强的特异性；同时可检出的副猪嗜血杆菌的最小量为1.4×102CFU/ml，该方法灵敏性较强；对分离到的八株副猪嗜血杆菌的16SrRNA基因进行测序，序列分析后发现其与GenBank上发表的副猪嗜血杆菌16S rRNA具有很高的相似性，同源性达98.6％—100％。
本研究通过对绵羊红细胞进行醛化和鞣酸化建立了副猪嗜血杆菌抗体的间接血凝的诊断方法，同时对该方法最适抗原、最适抗原浓度进行选择。试验结果表明：对抗原进行超声处理，鞣酸化后的红细胞与抗原比例为1：4时，检测效果最好；该方法对PRRS、PCV—2、PRV、CSF等病原阳性血清的检测结果均为阴性，说明该方法具有良好的特异性；采用间接血凝的检测方法对广东省送检的200份血清进行检测，检出阳性血清为69份，阳性率为34.5％(69/200)。