甲状腺乳头状癌是最常见的甲状腺恶性甲状腺肿瘤，约占成人甲状腺癌的60﹪-80﹪和儿童甲状腺癌的70﹪左右，具有临床生物学特性多样、总体恶性度较低、预后良好等特点。甲状腺乳头状癌的发病机制是一个复杂的过程，至今仍未明了。随着分子生物学的发展，人们对甲状腺乳头状癌的发病机制的认识逐渐增加，近年来证实甲状腺乳头状癌中存在多种癌基因和抑癌基因的异常，各种病因导致的癌基因的激活和抑癌基因的失活可使正常细胞转化为生长失控的恶性肿瘤细胞，而大多数癌基因与调控正常细胞分裂生长的各种生长因子及其受体密切相关。血小板源性生长因子(platelet-derived growth factor,PDGF)是由多种细胞产生的肽类生长因子，是在人体各器官组织广泛存在的一种有丝分裂原和化学趋化剂，在人体许多正常生理活动中有着重要作用。PDGF-B链基因与猴肉瘤病毒的癌基因v-sis有92﹪的同源性，因此PDGF-B链基因又称c-sis原癌基因。近年来随着对PDGF研究的深入，人们逐渐发现PDGF参与了多种人类疾病的发生和发展，并被证实与多种人类恶性肿瘤有着密切的关系。在人卵巢癌、胶质母细胞瘤及乳腺癌等恶性肿瘤中相继发现PDGF的高表达，并认为它在某些恶性肿瘤中与肿瘤特征性的血管生成和转移密切相关。 Matsuo K等发现在人甲状腺乳头状癌细胞系NPA培养过的条件培养基中有能强烈促进NIH3T3细胞系生长的物质，其促有丝分裂的活性可被PDGF-BB抗体部分阻断，经鉴定为PDGF-B链样的蛋白物质，而在人甲状腺滤泡状癌细胞系’WRO中却没有这种物质，由此认为人甲状腺乳头状癌细胞系NPA可分泌大量PDGF-B样的蛋白物质，此种物质可能对人甲状腺乳头状癌特征性乳头状结构的形成具有重要作用。本实验的目的是通过RT-PCR和免疫组化技术检测甲状腺乳头状癌组织中PDGF-A链和PDGF-B链的mRNA及蛋白的表达，初步探讨PDGF与甲状腺乳头状癌的关系。 材料与方法 第一部分 取行甲状腺乳头状癌根治术患者术中切除的癌组织标本13例(病例组)．术后经病理检验证实为甲状腺乳头状癌。另选取结节性甲状腺肿患者或甲状腺腺瘤患者手术切除的甲状腺组织中肉眼观察相对正常的甲状腺组织标本13例作为对照组。全部标本切除后迅速置于液氮中速冻，保存于液氮中。所有标本热缺血时间不超过30分钟。用Trizol试剂提取组织总RNA，然后采用RT-PCR技术研究病例组与对照组的PDGF-A链和PDGF-B链的mRNA表达情况。将每个RT-PCR扩增产物在1﹪琼脂糖凝胶上电泳、观察、成像。经图像分析获得目的条带的积分光密度后，将各条泳道目的条带的积分光密度值与同泳道GAPDH条带积分光密度值相比，得到积分光密度的相对值，以此作为数据，用SAS8.1软件包进行随机样本t检验对比病例组标本与对照组标本间PDGF-A和PDGF-B mRNA表达量差异。 第二部分 35例甲状腺乳头状癌组织标本(病例组)取自中山大学第一附属医院2002年-2006年行甲状腺癌根治术患者存档的石蜡块，患者术前均未经过任何抗肿瘤治疗，术后经病理检验证实为甲状腺乳头状癌。35例正常的甲状腺组织标本(对照组)取自中山大学第一附属医院2002年-2006年甲状腺腺瘤或节结性甲状腺肿手术患者切除标本的存档石蜡块中相对正常的甲状腺组织。所有标本均41μm厚连续切片，经HE染色病理确诊排除其他疾病并符合以上条件的方可入选。分别选用PDGF-A链和PDGF-B链兔抗人多克隆抗体免疫组化染色检测PDGF-A链和PDGF-B链蛋白表达情况。免疫组化切片在显微镜下观察染色情况，计算每张切片的HSCORE(histochemicalscore)得分，并以HSCORE得分代表该张切片PDGF-A链和PDGF-B链蛋白表达的水平，采用Wilcoxon秩和检验比较病例组与对照组数据，以P<0.05作为显著性意义的标准。 结果：第一部分： 统计结果显示，病例组与对照组之间PDGF-A链和PDGF-B链mRNA的表达均存在显著性差异(P<0.05)，病例组中PDGF-A链和PDGF-B链mRNA的表达均较对照组明显上调。 第二部分： 1．PDGF-A链主要表达于肿瘤细胞的胞浆中，在细胞膜上也有表达，而在癌旁的间质中仅有少量表达。甲状腺乳头状癌病例组(HSCORE中位数=1.92,SEM=0.46)与对照组(HSCORE中位数0.38，SEM=0.05)：PDGF-A链的表达有显著差异，P<0.05。PDGF-A链在甲状腺乳头状癌病例组中较对照组明显过度表达。 2．PDGF-B链也主要表达于肿瘤细胞的胞浆中，在细胞膜上也有表达，癌旁的间质中仅有少量表达。甲状腺乳头状癌病例组(HSCORE中位数=1.64，SEM=0.32)与对照组(HSCORE中位数=0.29，SEM=0.09)PDGF-B链的表达同样存在显著性差异，P<0.05。PDGF-B链在甲状腺乳头状癌病例组中较对照组明显过度表达。 结论 1．PDGF-A链和PDGF-B链均主要表达在肿瘤细胞胞浆中。PDGF-A链在甲状腺乳头状癌病例组中在mRNA和蛋白两个水平上较正常对照组均存在明显上调。病例组PDGF-B链在mRNA和蛋白两个水平上较正常对照组也均存在明显上调。 2．PDGF在甲状腺乳头状癌中存在过度表达，提示其甲状腺乳头状癌的关系密切，有可能成为甲状腺乳头状癌的一个潜在辅助诊断因子及治疗靶点。