白皮松（Pinus bungeana Zucc.）为我国特有的乡土树种,也是我国北方园林绿化与生态工程造林的优良树种。本研究以白皮松未成熟合子胚以及成熟合子胚为外植体,诱导体细胞胚胎发生。系统研究了白皮松体胚发生所涉及的各种影响因素,以及体胚发生过程中的生理生化特性。研究结果将为白皮松优良无性系繁殖、基因保存、遗传改良以及人工种子生产等方面奠定坚实的理论基础。具体结果如下:1. BM1、DCR1和改良MS三种培养基相比,接种于DCR1的未成熟合子胚生长迅速,愈伤组织较大,分化能力较强。DCR1培养基的平均胚性愈伤组织诱导率达到56.59%,说明DCR1培养基最适合进行白皮松胚性愈伤组织的诱导。2.白皮松胚性愈伤组织在含有较高浓度生长素2,4-D和较高浓度的细胞分裂素6-BA的培养基上诱导率较高。不同浓度的2,4-D和6-BA对白皮松胚性愈伤组织的诱导率均存在极显著差异,2,4-D和6-BA的组合存在交互作用并对其胚性愈伤组织诱导有显著影响。多重比较可知6 mg·L^-12,4-D+2 mg·L^-16-BA为诱导胚性愈伤组织的最佳激素浓度组合。3.不同发育时期的未成熟合子胚诱导率差异很大。6月30日采摘合子胚的胚性愈伤组织诱导率明显高于其他四个时期,最高达到97.22%,平均诱导率为76.23%。4. 7月30日和8月10日采集的白皮松成熟合子胚很难诱导出胚性愈伤组织。个别外植体产生的愈伤组织经继代培养后生长势也较弱,不能进一步分化成胚性细胞。5. 0.3 mg·L^-12,4-D+0.2 mg·L^-1NAA为胚性愈伤组织保持和增殖的最佳激素组合浓度。2,4-D与NAA的交互作用对胚性愈伤组织增殖存在显著影响。6.继代方式对胚性愈伤组织增殖率有显著影响。以固体/液体交替培养的方式进行增殖培养,增殖率可达88.89%。7.培养在附加9000 mg·L^-1肌醇和0.1 mg·L^-1IBA的DCR1增殖培养基上的胚性愈伤组织将形成后期原胚。加入低浓度的IBA,能使更多的胚性细胞团转化成具胚柄胚性细胞团。8.蔗糖浓度的变化对白皮松体细胞胚的成熟发育有着极显著影响。含有50 g·L^-1蔗糖和0.1 mg·L^-1IBA的DCR1培养基最适合白皮松体细胞胚的成熟诱导,该组合明显提高了白皮松体细胞胚的成熟频率。9.在10 mg·L^-1ABA+75 g·L^-1PEG的DCR1培养基上,体细胞成熟率最高,达到