祖国医学认为，五脏是人体生命活动的中心，五脏虚损是衰老的根本原因。其中，肾中精气渐亏与脑的老化密切相关。肾受五脏六腑之精而藏之，而脾主运化升清，乃后天之本，气血生化之源，五脏皆禀气于脾胃，故精髓之海必赖后天为之资。人过中年，其气降者多，升者少，清气不升则脑髓失养，神衰健忘。因此，补益脾胃是干预脑老化，延缓衰老的重要措施之一。同时，脾虚易生湿聚痰，痰凝气滞或脾虚气亏又可致血瘀，痰浊瘀血是影响衰老的重要因素，据虚实衰老说又当补泻并施。本课题根据脾胃为后天之本的理论，以补益脾胃为切入点，设益气健脾及益气健脾祛痰化瘀两种治法，旨在观察其防治脑老化的作用及其机制，并进行初步比较，为脾虚衰老及脑老化提供理论支持和实验依据。 本项研究主要采用以下方法： 1．选用昆明种2.5月龄的成年小鼠96只，随机分成正常对照组、模型对照组、中药A组、中药B组各24只。除正常对照组外，其余各组均采用D-半乳糖(D-galactose,D-gal)连续6周大剂量颈后部皮下注射，复制亚急性衰老及脑老化动物模型：造模同时，胃饲中药A组益气健脾药物、B组益气健脾祛痰化瘀药物。 2．实验第37天始用Morris水迷宫法观察脑老化模型小鼠学习记忆能力的变化，历时6天，之后取材并检测以下指标：①亚硝酸盐法、硫代巴比妥酸比色法、荧光法分别检测小鼠血清超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)、心肝组织丙二醛(methylenedioxyamphetamine，MDA)、脂褐素(liposcin，LPF)；②免疫组织化学SABC法和计算机图文分析系统检测小鼠大脑皮质、海马烟碱型乙酰胆碱受体(nicotinicacetylcholine receptor，nACh-R)、谷氮酸N-甲基-D-门冬氨酸受体(N-methyl-D-aspartate receptor，NMDA-R1)：③流式细胞术检测小鼠大脑神经元线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential，MMP)和神经元凋亡(apoptosis,博士学位论文APOP)百分率:④计算机图文分析系统检侧大脑皮层、海马神经元密度的变化;⑥放免法检测小鼠血清白介素一2(interleukin一2，工L一2):⑥光学显微镜观察小鼠大脑皮质、海马组织形态学的变化。 结果表明: 1.与正常对照组相比，模型对照组小鼠学习记忆能力明显下降、大脑皮质和海马部位的结构变化与老龄动物一致，说明D一gal造模小鼠发生了脑的拟衰老变化。 2.益气健脾与益气健脾祛痰化疲法均能有效千预脑的老化，改善学习记忆能力。 3.益气健脾和益气健脾祛痰化疲法对脑老化小鼠的影响表现在:①提高血清及心、肝SOD活力，不同程度地降低心、肝组织的娜A及沙F含t，降低肝组织沙F的作用益气健脾祛痰化痪法优于益气健脾法;②抑制大脑皮质及海马nACh一R和确DA一R1表达的降低，对皮质部位nACh一R表达的作用益气健脾祛痰化癖法优于益气健脾法;③稳定切眼，，保护线粒体功能，益气健脾法优于益气健脾祛痰化癖法:④益气健脾法抑制大脑神经元凋亡，益气健脾祛痰化癖法作用不显著;⑤维持大脑皮质神经元密度，保护神经元:⑥提高血清IL一2含量:⑦益气健脾法阳氏脚腺老化指数，益气健脾祛痰化察法作用不显著:⑧改善神经元结构，延缓神经元老化。 结论: 1.补益脾胃是干预脑老化，延缓衰老的重要措施之一。 2.益气健脾与益气健脾祛痰化癖法均能有效干预脑的老化，改善学习记忆能力。两者作用的途径、环节和程度有一定差别，但它们可能均是通过多途径和环节，作用于多个靶点产生整合调节从而发挥防治作用。 3.益气健脾与益气健脾祛痰化癖法千预脑老化的共同作用机制可能是 (l)调节机体过氧化损伤与抗氧化系统之间的平衡失调，提高抗氧化能力，作为抗氧化剂，干预机体及脑组织的衰老。 (2)提高N一乙酞胆碱受体及谷氨酸卜压。A受体表达，改善神经元之间的信息传递，维护神经环路通讯联络。 (3)稳定大脑神经元入仆护，维护线粒体功能。 (4)增加大脑皮质神经元密度，保护神经元。 (5)提高血清IL一2含量，改善机体免疫功能。 (6)改善神经元结构，延缓神经元老化。 4.益气健脾法与益气健脾祛痰化癖法干预脑老化作用机制的不同在于 (l)益气健脾法还能明显①抑制大脑神经元凋亡:②降低脚腺老化指数。博士学位论文 (2)益气健脾法稳定神经元h伍任的作用优于益气健脾祛痰化癖法。 (3)益气健脾祛痰化癖法①降低肝组织LPF:②提高nAC卜R在大脑皮质的表达优于单纯益气健脾法。