Grb7基因在早孕小鼠子宫内膜中的表达

来源 :重庆医科大学 重庆医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wuyonghong1974
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目的研究生长因子受体结合蛋白7(growth factor receptor bound protein7,Grb7)在早孕小鼠子宫内膜中的表达规律,探讨其在胚胎着床过程中的作用。方法1.收集标本:建立妊娠昆明小鼠动物模型,分离未妊娠(d0)和妊娠早期(d1~d7)小鼠的子宫内膜组织,分别冻存于-80℃备用。2.分别应用FQ-PCR、免疫组化和Western blot方法检测未妊娠及妊娠早期d1~d7小鼠子宫内膜Grb7基因及蛋白的表达情况和组织学定位。3.功能实验:孕3d下午8点子宫角注射Grb7反义寡核苷酸,孕7d观察胚泡着床数较正常组有无变化。结果FQ-PCR测得未妊娠(d0)和妊娠早期(d1~d7)小鼠子宫内膜组织均有Grb7mRNA表达,并在孕5d达到峰值;免疫组化及Western Blot分析显示GRB7蛋白在子宫内膜的表达规律与FQ-PCR基本一致。孕1d到孕4d, GRB7蛋白主要表达部位为腔上皮、腺上皮,基质细胞少量表达,孕5d、孕6d,GRB7蛋白表达较之前增强,并且在基质细胞开始明显表达,孕5d最强。孕6d着床点GRB7蛋白高表达于初级蜕膜区,着床旁GRB7蛋白高表达于基质细胞。子宫角注射Grb7反义寡核苷酸后胚泡着床数较正常组明显减少。结论Grb7在早孕小鼠子宫内膜中呈动态表达,提示它参与了胚胎着床的发育过程。
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