实验性变态反应性神经炎的全血灌流治疗的实验研究

来源 :天津医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yueyinxiangzhu
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目的:探讨MMP-9、NOS-2在实验性变态反应性神经炎中的作用及全血灌流吸附法的治疗效果。方法:用新鲜牛坐骨神经提取MBP借以Wister大鼠建立GBS的动物模型EAN。分别在症状初现期、高峰期、恢复期对EAN及对照组大鼠进行临床评分,取坐骨神经进行HE、丽春红G—亮绿SF染色和免疫组化以观察T细胞和髓鞘的病变,MMP-9、NOS-2的表达。正常大鼠及免疫后第15天的EAN大鼠检测其坐骨神经的传导速度。分别给予免疫后第13天的EAN大鼠以NS或全血灌流吸附治疗,对两组大鼠进行临床评分,在免疫后第18天进行病理、肌电图及MMP-9的检测。结果:经SDS-PAGE电泳鉴定,提纯的MBP主要成分位于14,000-30,000之间,分别为P2、P1、P0,用Folin-酚法测定蛋白(直接法/London法)浓度为7/20mg/ml,100g牛坐骨神经共得蛋白约200mg,MBP约占1/3-1/2。用MBP成功建立了EAN动物模型,实验组的大鼠大多于免疫后第7-9天出现症状,第13-18天疾病达到高峰,最高评分为10-12分,第22-25天症状开始好转;对照组大鼠未见明显异常。症状初现期、高峰期、恢复期的EAN大鼠和对照组大鼠的T细胞数分别为8.5±1.06、12.8±1.04、5.12±1.45、0.0±0.00,3组EAN大鼠与对照组相比较均具有统计学意义,Masson染色显示变性的髓鞘呈半环状,有的不着色,呈空白区,到达高峰期时,约1/2-3/4神经脱髓鞘。肌电图也显示传导速度明显降低,潜伏期明显延长。3组的EAN大鼠和对照组大鼠的MMP-9表达的位置是血管内皮细胞和雪旺细胞,个数分别是5.62±0.32,8.69±0.55,3.5±1.00,2.0±0.82,EAN三组分别与对照组相比,前两组有意义,而恢复期无意义。表达NOS-2的阳性细胞主要是T细胞。进行全血灌流吸附的EAN大鼠在免疫后第18-20天,大鼠体重可恢复到治疗前状态,而到第22-24天时与正常大鼠无异;免疫后第18天T细胞数为7.58±0.80,与EAN组比较具有统计学意义;脱髓鞘的比例约在30%左右,好于EAN组;传导速度也要快于EAN组。结论:MBP可成功建立EAN模型;在EAN中,MMP-9在血—神经屏障的破坏和髓鞘降解的过程中起作用。全血灌流(色氨酸吸附柱)对治疗EAN大鼠有效。
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