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受体蛋白激酶(ReceptorProteinKinaseRPK)是动物细胞信号转导中重要的信号介导因子。随着拟南芥基因组测序计划完成,发现在植物中存在大量与动物中受体蛋白激酶结构相似的蛋白,但多数受体功能尚不确定,故称之为类受体蛋白激酶(receptor-likekinaseRLK)。富含亮氨酸重复的亚家族(leucine-richrepeatsRLK,LRR-RLK)是植物类受体蛋白激酶家族(RLK)中最大的亚家族。已有研究表明该亚家族基因在调控植物体生长发育和抗逆性方面发挥重要作用。拟南芥中At1g09970编码一个含976aa的蛋白质,蛋白预测分析显示该蛋白胞外区含有12个LRR结构单元,是LRR-RLK亚家族成员。本研究克隆该基因、分析突变体及过表达植物表型、描述此基因的表达模式及亚细胞定位,取得了以下结果:
1.通过RT-PCR方法获得At1g099710的cDNA克隆。测序后,构建至表达载体pBI121上,借助农杆菌侵染得到其过表达转基因植物,观察可知,在平板培养过程中,过表达植物在根伸长方面有明显优势。
2.通过半定量RT-PCR的方法研究该基因的表达模式,表明该基因的表达贯穿于植物生长发育全过程,且受不同外界条件的影响。
3.通过PCR和RT-PCR在DNA和RNA水平上筛选鉴定At1g09970对应的T-DNA插入失活的突变体。对萌发和萌发后阶段进行突变体的表型分析结果表明,At1g09970突变体在萌发后对NaCl敏感,暗示该基因与植物的抗盐胁迫有关。
4.通过表达GFP融合蛋白,在共聚焦显微镜下显示此蛋白可能定位于细胞质膜。