目的齿科合金已经广泛应用于口腔修复领域中,在口腔内的复杂环境中,由于合会材料所析出的金属离子会对口腔细胞和组织形成不良刺激,所以对齿科合金生物相容性的研究一直是国内外学者的关注热点之一。随着分子生物学的迅速发展,生物材料生物相容性的研究手段逐渐多样化,其评价已从整体、细胞水平进入了分子水平。本研究应用免疫荧光和蛋白印记的方法检测了5种齿科合金及新研制的3种合金浸提液引起小鼠L929细胞发生凋亡时,线粒体内促凋亡蛋白的表达情况,探讨了金属材料诱导细胞凋亡的可能信号转导途径,为进一步揭示细胞凋亡的分子机制及从分子水平上评价材料的生物相容性提供实验依据。方法1、细胞培养L929细胞用含10%胎牛血清的RPMI 1640细胞培养基在37℃、5%CO₂.的培养箱中培养并传代。2、细胞线粒体跨膜电位的检测收集阴性对照组和实验组的L929细胞（3×10⁶个）于Ep管中,PBS清洗3遍,加入罗丹明123染液40ug/ml,37℃避光孵育60min,流式细胞仪检测罗丹明123的荧光强度。3、细胞色素C在细胞内分布的检测用荧光检测试剂盒检测细胞色素C在细胞内分布变化。4、Western Blotting蛋白印记Western Blotting检测阴性对照组和实验组的L929细胞的细胞色素C在线粒体和胞浆中的表达。结果1、细胞线粒体跨膜电位各组细胞随处理时间的延长,其罗丹明123荧光强度逐渐减弱,表明了线粒体膜电位发生了去极化。48小时的结果为:阴性对照组＞金合金组＞银钯合金组＞钴铬合会组＞镍铬合金组＞1号合金组＞2号合金组＞3号合金组。72小时的结果为:阴性对照组＞金合金组＞银钯合金组＞钴铬合金组＞1号合金组＞镍铬合金组＞3号合金＞2号合金组。2、间接免疫荧光检测细胞色素C的分布48小时处理组,除钴铬合金组,2号合金组,3号合金组外,细胞中细胞色素C蛋白的荧光分布为一些粗点或细块状。72小时处理组,细胞色素C蛋白的荧光在胞浆中分布较为明显,为弥散的细点状。3、Western Blotting蛋白印记在细胞线粒体和胞浆中均有细胞色素C的表达,并且随时间的延长,线粒体中的细胞色素C表达量逐渐减少,胞浆中的表达量逐渐增多。结论1、7种齿科合金中的金属离子都会不同程度地诱导细胞凋亡,且其凋亡途径为线粒体途径。2、在凋亡的过程中,伴有促凋亡蛋白细胞色素C由线粒体到胞浆的释放过程及线粒体跨膜电位的下降。3、金属合金可能引起细胞色素C表达的改变且不同金属之间存在差异。4、细胞色素C表达的检测可能成为评价金属合金生物相容性的指标之一。