人参皂苷Rg3联合5-Fu对胃癌荷瘤裸鼠肿瘤侵袭转移及CD133表达的影响

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目的:建立裸鼠人胃癌NUGC-4原位移植瘤模型,予人参皂苷Rg3联合5-Fu干预,探讨人参皂苷Rg3联合5-Fu对模型鼠远处转移、肿瘤组织中CD133表达的影响以及探讨人参皂苷Rg3对化疗后小鼠造血功能的影响。方法:1.利用原位肿瘤移植的方法,将人胃癌NUGC-4瘤株建立在BALB/C裸鼠胃大弯部,观察肿瘤移植后小鼠生存状态。2.按完全随机的方法将32只模型裸鼠分为4组,即:生理盐水组、人参皂苷Rg3组、5-Fu组、Rg3+5-Fu组,每组8只。在原位移植后9d,生理盐水组给予生理盐水尾静脉注射,每只0.2mL/次,Q2d×15;5-Fu组给予5-Fu注射液,标准为20mg/kg,给药方式为腹腔注射,每周1次,连续3周:人参皂苷Rg3组以尾静脉注射的方式给予人参皂苷Rg3,标准为1mg/kg,Q2d×15,Rg3+5-Fu组为上述5-Fu组、人参皂苷Rg3组的联合。3.实验结束后,拉颈处死所有动物,打开每只裸鼠腹腔,收集原位肿瘤组织,称取肿瘤体重,计算抑瘤率,观察每组远处转移的裸鼠数量,计算各组远处转移率。4.运用免疫组织化学方法检测肿瘤组织中CD133的表达。5小鼠处死后眼球取血,制作血涂片,高倍显微镜下观察各组血涂片中红细胞、白细胞以及血小板的形态、排列及分布情况。结果:1.成功建立胃癌NUGC-4裸鼠原位移植模型,造模后第二周起,可在部分裸鼠上腹部触及肿块,质地较硬。移植瘤原位移植成功率100%。2.测定瘤重,计算抑瘤率。人参皂苷Rg3、5-Fu组、Rg3+5-Fu组的抑瘤率分别为48.6%、69.2%、78.5%,人参皂苷Rg3组、5-Fu组、Rg3+5-Fu组与生理盐水组比较,移植瘤质量有明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。3.计算各组远处转移率。人参皂苷Rg3组、5-Fu组、Rg3+5-Fu组的远处转移率均明显低于生理盐水组,差异有统计学意义(P<0.05);Rg3+5-Fu组的远处转移率最低,Rg3组、5-Fu组较生理盐水组远处转移率也有降低,差异有统计学意义(P<0.05)。4.各组肿瘤组织中的CD133的阳性率分别为:生理盐水组86.2%,Rg3组36.7%,5-Fu组38.6%,Rg3+5-Fu组26.5%,与生理盐水组相比,其余3组均能抑制瘤组织中CD133的表达,差异具有统计学意义(P<0.05),尤其Rg3+5-Fu组与生理盐水组比较,差异显著,具有统计学意义(P<0.01)。5.血涂片结果显示5-Fu组血涂片显示白细胞比例明显减少,成熟红细胞大小不等,聚集的血小板较少。生理盐水组和Rg3组涂片中可见数量较多的白细胞,成熟红细胞形态基本正常,聚集的血小板成堆可见,且两组之间的差异不大,无统计学意义(P>0.05)。5-Fu组与生理盐水组比较有显著统计学差异。Rg3+5-Fu组较5-Fu组白细胞数量稍多,红细胞形态也较为规则,聚集的血小板也相对较多,差异具有统计学意义。以上结果提示,5-Fu对小鼠造血功能有一定损伤,而联合人参皂苷Rg3后可回升小鼠造血功能,说明人参皂苷Rg3对联合化疗小鼠造血功能有保护作用。结论:1.利用人胃癌NUGC-4瘤株成功建立裸鼠原位移植模型,人参皂苷Rg3联合5-Fu对裸鼠原位移植瘤的生长具有明显的抑制作用,同时能有效降低肿瘤远处转移率;2.人参皂苷Rg3联合5-Fu化疗能有效降低肿瘤组织中CD133的表达,且肿瘤组织中CD133的表达与肿瘤远处转移密切相关;3.人参皂苷Rg3对化疗后小鼠造血功能有回升作用。
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