牙周炎和种植体周围炎miRNAs表达谱研究及Real-time PCR验证

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目的:miRNA(microRNA)是由19-25个核苷酸组成,参与基因转录后水平调控的非编码单链RNA,其广泛参与器官形成、发育、凋亡、细胞增殖、肿瘤等生理和病理过程的调控。牙周炎和种植体周围炎是导致天然牙与种植体松动脱落的主要原因,因此本实验以miRNA为切入点,通过建立犬动物模型,探究并比较牙周炎和种植体周围炎炎症组织中miRNAs的表达谱并筛选特定miRNA进行Real-time PCR验证,为最终合成组织工程复合物有效控制和修复牙槽骨炎症性的骨缺损打基础方法:在6只实验拉布拉多犬口内通过改良丝线结扎法同时诱导牙周炎和种植体周围炎。分别提取健康牙龈组织、牙周炎炎症组织与种植体周围炎炎症组织进行miRNA测序,比较其差异,筛选差异变化较大的miRNAs进行Real-time PCR验证测序结果的可靠性。结果:实验结果表明两种炎症组织与正常牙龈组织miRNA表达谱存在显著差异,挑选牙周炎与种植体周围炎组均低表达(cfa-let-7g、cfa-miR-27a)、牙周炎组显著高表达而种植体周围炎组显著降低(cfa-miR-29a)、种植体周围炎组显著高表达而牙周炎组显著低表达(cfa-miR-142)共4种miRNA进行Real-Time PCR。结果显示cfa-let-7g、cfa-miR-27a、cfa-miR-29a相对表达趋势与测序结果吻合,其中cfa-miR-27a表达差异具有统计学意义(p<0.05)。结论:本实验通过miRNA测序,证明多种miRNA在三种组织间差异表达,cfa-let-7g、cfa-miR-27a、cfa-miR-29a和cfa-miR-142可能与牙周炎与种植体周围炎的发生发展密切相关,结合Real-time PCR验证结果,cfa-miR-27a在两种炎症组织中均显著低表达,可能通过其靶基因参与下游生物学过程从而起到抑制炎症的作用。
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