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目的:研究姜黄素自微乳释药系统对雄激素非依赖性前列腺癌细胞株PC-3细胞增殖、摄取、周期、凋亡的影响,以及其在体肠吸收情况。方法:1.制备姜黄素自微乳释药系统:以姜黄素为模型药物,RH40/吐温80为表面活性剂,MCT为油相,甘油为助表面活性剂。最佳处方配比分别为MCT:RH40:甘油=22.5%:49.32%:28.18%,MCT:吐温:甘油=15%:60%:25%,载药量为1%。测定粒径、电位等理化性质。2.制备姜黄素自微乳冻干剂:精密量取姜黄素自微乳(吐温80处方/RH40处方)2m L,加入乳糖作为冻干保护剂,浓度为8%(W/V),-80℃预冻24h,冷冻干燥24h。将制得的姜黄素自微乳冻干剂加入PBS复溶,测定粒径变化情况。并分别以15%乙醇人工胃液和15%乙醇人工肠液为溶出介质测定姜黄素自微乳冻干剂溶出度。3.姜黄素自微乳释药系统对PC-3细胞增殖活性的影响:应用MTT法,将不同浓度的姜黄素自微乳(RH40处方和吐温80处方)和姜黄素作用于人前列腺癌PC-3细胞,分别给药24、48和72h后,加入MTT,孵育4小时,弃上清,DMSO10min内溶解甲瓒结晶,酶标仪在490nm波长测得各孔吸光度即OD值,计算各组细胞存活率。4.姜黄素自微乳释药系统对PC-3细胞的摄取实验:将60μg/m L的姜黄素自微乳(RH40处方和吐温80处方)和姜黄素作用于人前列腺癌PC-3细胞,分别孵育不同时间(0.5,1,3,6,9,12,24h)后置于荧光显微镜下拍照记录荧光强度,并收集各组细胞悬液处理后进样HPLC色谱仪,计算不同时间点细胞的摄药量。5.姜黄素自微乳释药系统对PC-3细胞周期的影响:将不同浓度的姜黄素自微乳(RH40处方和吐温80处方)和姜黄素作用于人前列腺癌PC-3细胞,分别给药24、48和72h后,收集各组细胞悬液处理染色后运用流式细胞仪技术分析细胞周期。6.姜黄素自微乳释药系统对PC-3细胞凋亡的影响:将60μmol/L的姜黄素自微乳(RH40处方)和姜黄素作用于人前列腺癌PC-3细胞,给药48h后,收集细胞悬液处理染色后运用流式细胞仪检测细胞凋亡率。7.姜黄素自微乳释药系统大鼠在体肠吸收研究:以姜黄素自微乳释药系统为研究对象,采用大鼠在体单向肠灌流模型,HPLC法检测姜黄素的含量,研究药物浓度和不同肠段对姜黄素自微乳释药系统吸收的影响。结果:1.RH40处方姜黄素自微乳释药系统平均粒径为18.10±2.4nm,ζ电位值约为-12.1±0.55m V,PDI为0.100±0.02;吐温80处方姜黄素自微乳释药系统平均粒径为18.97±2.9nm,ζ电位值约为-14.8±0.76m V,PDI为0.114±0.02。两种处方的姜黄素自微乳释药系统粒径较小,分布均匀,电位绝对值较大,说明自微乳体系稳定。2.RH40处方姜黄素自微乳冻干剂复溶后平均粒径为20.23±2.6nm,PDI为0.102±0.02,吐温80处方姜黄素自微乳冻干剂复溶后平均粒径为23.35±2.5nm,PDI为0.085±0.02。与冻干前姜黄素自微乳相比,粒径增大,但增加程度较低。溶出度实验中姜黄素自微乳冻干剂在15%乙醇人工胃液和15%乙醇人工肠液中均能在1min左右全部溶出,溶出度分别为109.06%和103.50%,说明姜黄素自微乳冻干剂仍可保障姜黄素的良好溶出行为。3.姜黄素自微乳化释药系统对PC-3细胞增殖的抑制作用强于姜黄素原药。MTT法检测结果显示,与姜黄素处理组相比较,姜黄素自微乳释药系统(RH40处方和吐温80处方)处理组对人前列腺癌PC-3细胞的增殖具有更强的抑制作用(P<0.05),并且抑制作用随着浓度的升高和时间的延长更加明显。4.姜黄素自微乳释药系统具有增加细胞摄取,持续药物释放和提高药物稳定性的作用。姜黄素在1h时细胞摄取量达到最大值,但在1h后姜黄素药物浓度迅速降低;而姜黄素自微乳释药系统在3h摄取量达到最大值后,24h以内药物浓度并无大幅度下降。表明了姜黄素自微乳释药系统能够增加姜黄素的稳定性,并可以发挥一定的的缓释作用。荧光显微镜观察结果与上述结果一致。5.姜黄素自微乳释药系统处理PC-3细胞后,阻滞细胞周期于G2/M期,且具有时间和量效关系。不同浓度的姜黄素和姜黄素自微乳释药系统分别作用PC-3细胞后,姜黄素在低浓度时对细胞周期时相影响不明显,在高浓度时才对细胞周期产生影响,阻滞细胞周期于G2/M期;而姜黄素自微乳释药系统不仅可以将细胞周期阻滞在G2/M期,还可以将细胞周期阻滞在S期,说明姜黄素自微乳释药系统能够比姜黄素更有效的阻滞细胞周期。6.姜黄素自微乳释药系统(RH40处方)处理PC-3细胞后,凋亡率升高。流式细胞仪检测分析,给药48h后,姜黄素和姜黄素自微乳组的细胞凋亡率分别为(16.23±1.02)%,(26.29±2.17)%,与对照组(3.53±0.25)%相比,姜黄素和姜黄素自微乳释药系统(RH40处方)都可以有效增加细胞的凋亡,但是作用细胞同一浓度同一时间时,姜黄素自微乳能够更加显著的诱导细胞的凋亡。7.姜黄素自微乳释药系统在大鼠十二指肠、空肠、回肠均有吸收,且在十二指肠的吸收系数最大。两种处方的姜黄素自微乳释药系统的小肠吸收与姜黄素相比均有显著性提高(P<0.05)。姜黄素自微乳释药系统的吸收存在饱和现象,推测姜黄素自微乳释药系统的小肠吸收为主动转运。结论:与姜黄素相比,姜黄素自微乳释药系统能显著抑制人前列腺癌PC-3细胞的增殖活性,增加细胞对药物的摄药量,并能阻滞PC-3细胞周期在G2/M期,阻止细胞有丝分裂,诱导细胞凋亡,具有一定的抗前列腺癌的作用;且姜黄素自微乳能明显提高姜黄素的口服吸收。