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云南山茶(Camellia reticulata Lindley)为山茶科(Theaceae)山茶属(Camellia)植物。具有重要的观赏价值和经济价值,集观赏、油用、药用等价值为一身,是云南的传统特色花卉,为云南八大名花之首,被选为昆明市和其他城市的市花。主要分布于云南,在四川西南部、贵州西部有少量分布。云南山茶在我国已有1500多年的栽培历史深受各族人民喜爱,直到150年前才引入西方庭园。千百年来云南人民栽培山茶,欣赏山茶,吟咏山茶,现已成为了国内外享有盛誉的名花,目前已有500多个品种。我们认为云南山茶目前如此丰富多样的格局是因为受传统文化的影响而形成的。本研究尝试用民族植物学的观点和方法,通过野外调查、挖掘整理,记述与云南山茶相关的传统文化,探究人文因素体现的不同地域人们的审美、意识及文化等。再运用现代民族植物学的研究方法,利用AFLP分子标记对云南山茶花的遗传多样性进行分析,分析云南山茶在传统文化影响下的遗传多样性水平,以此来验证我们的假设。以民族植物学为背景提出假设,对云南山茶人文因素的分析也将弥补该领域的空白,并希望为其他植物的类似研究提供参考。对云南山茶进行了民族植物学调查。主要调查了云南的昆明、楚雄、大理、丽江、腾冲五个云南山茶集中分布的地方,对云南山茶相关传统文化有了较为全面的了解。这五个地区的共同特点就是都有着悠久的历史和丰厚的文化底蕴,调查地区的少数民族为彝族、白族、纳西族居多,文化多样性非常丰富,历史文化源远流长。在这些地区,既受外来文化的影响,同时又融入了本民族的文化要素,呈现出多元文化交融的特点:(1)宗教信仰的保护作用。根据调查显示,多数古茶花分布于寺院庙宇中,一方面是由于云南山茶花本身的花德和气质,这与被作为供佛用花有关;另一方面佛教本身普爱生灵,植于寺庙中的茶花被历代僧人精心养护;还有就是世人对佛的敬畏之情,对于寺庙财产也多敬畏有加。在云南,很多地方都信奉原始宗教,其中保留着大量的保护生态环境的思想观念和行为习惯,与生物多样性相关的思想主要表现在自然崇拜、图腾崇拜和祖先崇拜等形式当中。在彝族文化中众多的茶花古树保存在土主庙中,是传统文化在古树保护中的重要体现。以东巴教为基础的纳西族原始宗教崇尚万物有灵,与自然和谐相处,更多的表现在对茶花及各种生物的保护和崇拜。(2)古代经济交往的传播作用。根据调查,栽培型茶花古树主要分布于古交通干线(即西南丝绸之路)沿线的交通节点上,如大理、昆明分别是元朝以前和之后的政治、经济文化中心。云南山茶集中分布地区正好是这条古交通干线的必经之地。这与现如今云南山茶的基本格局基本吻合:云南山茶的次生分布中心、变异中心在腾冲;古树遗留最多在楚雄;现代栽培中心是大理和昆明。(3)民族文化的推动作用。根据调查,主要分布的五个民族地区的茶花文化都有所不同。在大理白族被作为庭园用花和身份的象征;楚雄彝族是对茶花怀有崇敬之情;在腾冲则又被作为油料植物。每个分布地区都有自己独特的山茶文化,从不同角度对云南山茶多样性产生推动作用。在民族植物学调查的基础上,获得了云南山茶5个居群190个个体的DNA样品,利用AFLP分子标记对云南山茶花的遗传多样性进行分析。对云南山茶5个居群190个个体的AFLP分析表明,采用4对引物,产生387个条带,平均每对引物检测到96.75条带,条带范围大致集中50-455 bp之间,多态性比率为100%,4对引物能很好地区分云南山茶的个体差异,因此我们认为,AFLP分子标记在云南山茶遗传多样性和亲缘关系分析中具有高效性。遗传多样性分析结果显示:有效等位基因(He)和基因多样性(H)分别为1.5799、0.3470;Shannon信息指数(I)和基因多样性(H)均以引物组合E-ACC/M-CAA最高,引物组合E-ACG/M-CTC最低;无论在个体水平Hap=0.3470,Isp=0.5241)还是在种群水平(Hpop=0.3470,Ipop=0.5241)遗传多样性均高于云南山茶遗传多样性相关研究,可以看出基于AFLP标记的云南山茶遗传变异水平较高。对5个云南山茶居群的AMOVA分析结果表明,有3.96%发生在种群间,96.31%的变异发生在种群内,居群内变异程度远比居群间高,说明云南山茶遗传变异主要存在于居群内。遗传分化和遗传一致度结果显示云南山茶遗传分化度(GsT)均大于0.9,在物种水平上也发现居群间的遗传分化不显著(GST=0.0518),就是说群体的遗传多样性主要来源群体内部。基因流系数Nm=9.1598,表示遗传变化是由亲本(杂交)引起的,也可以说是人为因素引起的。综合研究分析,云南山茶具有较高遗传多样性可能是由以下原因导致的:(1)云南山茶是多年生异交木本植物,本身就比其他生活型和繁殖系统的物种的遗传多样性要高。云南山茶的散播方式主要是原始的依靠种子重力作用落地传播,这就导致其传播距离是有限的。理论上,这样的传播方式将导致其群体间的遗传变异大于群体内的遗传变异现象,但是我们的实验结果却与这个现象正好相反。很有可能的情况是:在云南山茶散播过程中,人为因素起了很大作用。(2)云南山茶具有复杂的多倍化现象。云南山茶是异源多倍体植物,山茶属一些植物可能参与了云南山茶多倍化过程,均对其高的遗传多样性做出了贡献。这种杂交和异源多倍化也可能导致云南山茶居群遗传分化与地理距离之间的不相关。聚类结果也证明了这一点。(3)云南山茶目前的遗传多样性水平和居群遗传结构特征与历史、民族文化等密切相关。根据研究可知,5个居群中,楚雄的遗传多样性表现最高,这与该地区丰富的彝族文化、原始宗教文化密不可分。(4)云南山茶悠久的栽培历史,产生了很多不同的栽培品种。多种的杂交形成了多样的形态,最后形成现在茶花栽培品种如此惊人的格局。根据对云南山茶民族植物学的调查,并利用现代分子标记技术对云南山茶遗传多样性进行分析,可知云南山茶独特的文化内涵促使现在多样性格局的形成,可以说,云南山茶丰富遗传多样性是由于其丰富的文化内涵成就的。