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目的:DEK是一种广泛存在于多细胞生物细胞核内可磷酸化的癌蛋白,其序列高度保守且无亚型,在增殖活跃的细胞和多种人类恶性肿瘤细胞中呈现不同程度的过表达,与多种恶性肿瘤的发生与发展有着密不可分的关系。微小RNA(miRNA)的长度为19至25个核苷酸,其在基因调控中的作用十分重要。本论文旨在研究miR-1204对人肺癌细胞(A549、SPC)凋亡的作用和其潜在分子机制。方法:本实验首先通过RNA-Seq检测DEK沉默组与对照组的肺癌细胞,分析差异表达序列,筛选出差异表达的miRNA。进一步,通过miRNA预测工具预测miR-1204的靶基因,发现其可能靶向作用于DEK。为了验证miR-1204的靶向作用,我们检验了其对DEK3’-UTR的作用,并向肺癌细胞中转染miR-1204类似物或抑制剂检测其中DEK表达水平的变化。接下来,我们探究了 miR-1204对细胞凋亡的影响,并进一步探索了凋亡的机制。我们使用流式细胞技术检测miR-1204对肺癌细胞凋亡的影响,并进一步通过Hoechst33258染色法进行验证;采用实时荧光定量RT-PCR法与Western Blotting方法分别检测miR-1204和DEK对凋亡相关基因BCL-2和BAX表达水平的作用;使用Western Blotting方法分别检测细胞色素C在胞浆与线粒体中的水平;使用荧光检测底物LEHD-AFC的方法确定相关Caspase活性的变化。结果:在miR-1204过表达的肺癌细胞中,DEK 3’-UTR序列荧光素酶活性明显降低,DEK表达水平则呈现下调;在miR-1204抑制的肺癌细胞中DEK表达水平则呈现相反的趋势。DEK沉默使肺癌细胞的凋亡率增加,细胞中凋亡相关蛋白BCL-2下调,BAX上调。miR-1204的过表达也使肺癌细胞的凋亡率增加,细胞中凋亡相关蛋白BCL-2下调,BAX上调;miR-1204的抑制则使肺癌细胞的凋亡率减少,细胞中凋亡相关蛋白BCL-2上调,BAX下调。进一步,通过细胞染色可观察到DEK沉默组和miR-1204过表达组的凋亡形态细胞数量增多。我们的研究结果表明,miR-1204过表达后,细胞色素C在胞浆中的水平有显著升高,且Caspase-9和Caspase-3参与了 miR-1204-DEK介导的细胞凋亡,说明miR-1204-DEK介导的细胞凋亡是经由线粒体途径的细胞凋亡。结论:DEK为miR-1204的靶基因,miR-1204通过抑制DEK的表达调控细胞凋亡。miR-1204-DEK途径的细胞凋亡涉及BCL-2的下调和BAX的上调。最终,此细胞凋亡是通过细胞色素C相关的线粒体途径,并由Caspase-9和Caspase-3来执行。