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目的通过正畸丝结扎联合牙龈卟啉单胞菌脂多糖(Porphyromonas gingivalis.Lip opolysaccharide,P.g LPS)注射法建立大鼠实验性牙周炎模型,建模成功后去除正畸结扎丝然后分别进行牙周基础治疗(Scaling and root planning,SRP)以及牙周基础治疗+低能量激光照射(Low level laser irradiation,LLLI)辅助治疗,分别取大鼠外周血(Peripheral blood,PB)、牙龈组织及颌骨样本,观察单纯SRP治疗组与增加了LLLI辅助的SRP治疗组实验性牙周炎大鼠的牙龈组织及外周血中趋化因子c-c配体2(The chemokine C-C motif ligand 2,CCL2)、细胞间粘附分子-1(Intercellular cell adhesion molecule-1,ICAM-1)、转录因子c-Jun及c-Fos的表达相比正常对照组及牙周炎组的变化,以及LLLI辅助SRP治疗组与单纯SRP治疗组的表达的变化。分析CCL2、ICAM-1、c-Jun及c-Fos的变化规律与牙周组织状态之间的关系,及其与低能量激光照射的变化关系,进一步探讨低能量激光在牙周炎抗炎治疗中的可能作用机制,以及转录因子c-Jun和c-Fos所涉及的信号转导通路在CCL2、ICAM-1表达中的可能作用,以期为牙周炎的激光辅助治疗提供实验基础。方法选取20只纯种6周龄雄性清洁级SD大鼠随机分为四组:C组(Normal control group)、P组(Experimental periodontitis group)、SRP组(Experimental periodontitis+local debridement treatment group)、SRP+LLLI组(Experimental periodontitis+local debridement treatment+low-energy laser irradiation group),每组5只。采用正畸结扎丝结扎大鼠磨牙牙颈部和注射P.g LPS法建立实验性牙周炎大鼠模型。C组则未采取任何干预措施。P组在建模两周即建模成功后处死。SRP组在建模两周后予以去除正畸结扎丝,局部清创治疗。SRP+LLLI组在建模两周后予以去除正畸结扎丝,然后局部清创治疗和低能量激光照射辅助治疗持续两周,每周3次。四组建模成功后处死所有实验大鼠,采集各组实验大鼠的外周血及牙龈组织、颌骨样本。实验结束前各组实验大鼠的牙周状况均由经过专业训练的同一专业人员检查。将上颌骨样本制作牙体牙周组织连续切片,进行苏木精-伊红染色(Hematoxylin-eosin staining,HE)观察牙龈组织形态学的变化;抗酒石酸酸性磷酸酶(Tartrate resistant acid phosphatase,TRAP)染色观察大鼠牙槽骨破骨细胞的情况;免疫组织化学(Immunohistochemistry,IHC)染色法检测牙龈组织中CCL2、ICAM-1、转录因子c-Jun及c-Fos的表达变化;聚合酶链反应(Polymerase chain reaction,PCR)检测牙龈组织及其外周血白细胞中CCL2、ICAM-1、转录因子c-Jun及c-Fos的基因表达情况。结果1.P组大鼠牙龈组织呈明显的暗红色,伴有组织水肿充血,探诊出血,牙周袋的形成;SRP组大鼠较P组大鼠的牙龈红肿、出血有较明显的改善,但是仍然高于正常对照组,而SRP+LLLI辅助治疗组牙龈红肿、出血则基本消失;C组大鼠牙龈无明显炎症性改变。2.在光镜下观察组织学切片,C组HE染色可见粗大的胶原纤维,无明显炎症性病理表现;P组HE染色可见牙周组织有明显炎症性改变,可见结缔组织层胶原纤维水肿、变性,大量炎症细胞出现,牙槽骨出现破骨性骨吸收陷窝,陷窝内明显可见活跃的破骨细胞,TRAP染色可见大量的破骨细胞;SRP组HE染色可见牙周组织中炎性细胞明显减少,牙槽骨吸收呈静止状态,TRAP染色可见破骨细胞大量减少;SRP+LLLI组HE染色可见牙周组织中炎性细胞基本消失,并可见纤维结缔组织新生,TRAP染色可见破骨细胞基本消失。3.IHC染色可见:P组牙龈组织中CCL2、ICAM-1、转录因子c-Jun及c-Fos表达水平显著高于C组,而SRP组与SRP+LLLI组CCL2、ICAM-1、转录因子c-Jun及c-Fos表达水平均低于P组,且SRP+LLLI组相对于单纯SRP组下降更为明显。4.PCR结果显示:P组大鼠外周血白细胞及牙龈组织中CCL2、ICAM-1、转录因子c-Jun及c-FosmRNA表达较C组显著上调(P<0.05),而SRP组与SRP+LLLI组CCL2、ICAM-1、转录因子c-Jun及c-Fos的mRNA表达较P组明显下降(P<0.05),且SRP+LLLI组相对于单纯SRP下降的更为明显。结论1.正畸丝结扎加P.g LPS注射法可较短时间成功建立大鼠实验性牙周炎模型,该模型是研究牙周炎组织病理变化的有效手段,可为牙周病的临床研究提供科学实验依据,对牙周病的临床研究有着重要意义。2.本研究证实了实验性牙周炎组大鼠的外周血及牙龈组织中CCL2、ICAM-1、转录因子c-Jun及c-Fos的表达明显高于正常对照组,表明CCL2、ICAM-1、转录因子c-Jun及c-Fos在牙周炎的发生发展中起着一定作用。3.在牙周炎症发生发展过程中,CCL2、ICAM-1、转录因子c-Jun及c-Fos不仅在牙龈组织中表达升高而且在外周血中表达也升高,说明牙周炎与某些全身疾病紧密相关,牙周组织中的炎症因子也可能会随血液循环至全身,可能导致全身其他系统的不良反应。4.实验性牙周炎经牙周基础治疗后,牙龈组织及外周血中CCL2、ICAM-1、转录因子c-Jun及c-Fos水平明显降低并且其下降水平与牙周组织炎症改善程度一致。650nm半导体低能量激光辅助牙周基础治疗进一步改善了牙周组织炎症状况和降低炎症因子的水平,提示低能量激光照射对大鼠慢性牙周炎能起到良好的辅助治疗作用,有效地降低牙周组织的炎症程度和破坏程度。