海洋拮抗细菌胞外产物抗菌活性研究及其在水产品加工储藏中的应用

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水产品营养丰富,是人们食用蛋白的重要来源。但是由于其营养物质和水分含量都很高、pH值接近中性,加上肌肉中结缔组织比较少,捕捞后,如不马上采取有效保鲜措施,很容易滋生细菌引起腐败变质。而海洋中有许多细菌能够产生新颖独特的生物活性物质,能够抑制水产品腐败细菌,因此,对其进行研究具有非常重要的意义。本文以对扇贝中附生的海洋细菌为研究对象,筛选和鉴定具有抗菌活性的细菌,对其抗菌活性进行研究,并将其应用于水产品加工与贮藏保鲜过程中,研究其抑制水产品中腐败菌生长的有效性,从而有效提高水产品质量。主要研究结果如下:1.采用平板点种法对从水产品中分离纯化后的细菌进行测试,并通过其对所保藏菌株的抑菌活性做了初步筛选,从中筛选出一株具有较高抗菌活性菌株S2。该菌对19株指示菌中的17株都有不同程度的抑制作用,其中对V8的抑制作用最明显,这表明该菌株的抗菌谱较广,抗菌效果相对较好。通过形态学和生理生化特征及16S rDNA序列同源性分析,构建系统发育树进行分析,对抗菌效果良好的菌株S2进行了鉴定。结果表明,菌株S2的16S rDNA与Pseudoalteromonas peptidolytic的同源性最高,综合生理生化特征鉴定结果,初步确定其为Pseudoalteromonas peptidolytic,我们将其命名为Pseudoalteromonas peptidolytic S2。2.对有抗菌活性的细菌S2进行培养,测定了其生长曲线,其生长的延滞期为0~15h,指数生长期为15~60h,稳定期为60~105h,此后进入衰亡期。抗菌活性从26h开始出现,在稳定期达到最大值。S2对大多数抗生素有较强的敏感性,对部分抗生素(青霉素G、阿奇霉素、卡那霉素、头孢氨苄、萘啶酸、氟哌酸、红霉素)有较强的抗性。3.在已有研究的基础上对另一株拮抗细菌SA10胞外产物的抗菌活性进行了研究。SA10胞外产物中的抑菌活性物质对温度的适应性很强,只有低温(0℃左右)和高温条件(80℃以上)才会使其抑菌活性有所降低,而受pH值影响较大。乙醇沉淀实验表明,SA10发酵液中的抗菌物质可被乙醇沉淀,且该抗菌物质对副溶血弧菌的生长起到显著抑制作用。经毒理学研究,抗菌活性物质对小白鼠没有明显的毒副作用。4.将分离纯化后的抗菌胞外产物应用于水产品生产加工过程,以扇贝育苗和加工为实验对象,拮抗细菌SA10胞外产物对提高水产品养殖的水体微生物环境质量有明显效果,将胞外产物应用于水产品养殖可以有效减少药物用量,提高产品品质。并且,它可以改善水产品低温储存过程中品质,抑制细菌繁殖,延长产品货架期。
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