目的近年来研究发现肿瘤组织中存在一群具有自我更新以及多向分化等一系列正常干细胞特征的细胞，这群细胞被命名为肿瘤干细胞（cancer stem cells or tumorstem cells, CSCs or TSCs）。尽管肿瘤干细胞在肿瘤组织中所占比例较低，但它们具有很强的致瘤性，对放疗、化疗不敏感，是肿瘤复发和转移的根源。常用的分离和富集肿瘤干细胞的方法之一是侧群细胞（side population cells, SP细胞）分选，目前已经在多种正常组织和一些实体肿瘤中分离得到了SP细胞，SP细胞富集了肿瘤干细胞，因此具有肿瘤干细胞样的特性。胃癌（gastric carcinoma）已成为严重危害人类健康的常见消化道恶性肿瘤之一，中国是胃癌高发区，其发病率及死亡率均很高。迄今为止，国内外对胃癌干细胞的研究报道仍较少见，本研究拟通过对胃癌细胞系中SP细胞的研究，了解胃癌干细胞的生物学特性，为胃癌的靶向治疗提供新的思路。方法取对数生长期的胃癌细胞系用Hoechst33342染色，对比利血平抑制实验，通过流式细胞仪无菌分选收集荧光阳性的非SP细胞（non-side population cell，NSP cell）和荧光表达最弱的SP细胞。通过研究两群细胞的平板克隆形成实验、化疗药敏实验以及裸鼠移植瘤实验，比较两亚群细胞的生物学特性。使用PI3K/Akt通路特异性抑制剂处理人胃癌细胞系，通过流式分析SP比例的变化及人胃癌细胞系细胞体外软琼脂克隆能力的变化，进一步探讨SP细胞存在和维持的机制。结果通过SP分析，我们发现胃癌细胞系BGC-823及MGC-803均含有不同比例的SP细胞。针对来源于MGC-803细胞系的SP细胞我们进行了一系列研究，发现这些细胞具有干细胞的一些关键特征。与NSP细胞相比，它们具有较高的平板克隆形成能力（P<0.01），能够分化产生NSP细胞并维持自身的SP细胞。通过化疗药敏实验证实SP细胞具有很强的耐药性。从NOD/SCID小鼠体内成瘤性实验我们发现，SP细胞具有很强的致瘤能力，10000个SP细胞就可以形成肿瘤，而NSP细胞需要至少500,000个细胞才能形成肿瘤，SP细胞的肿瘤形成能力比NSP细胞高出至少50倍。为了进一步探讨SP细胞存在和维持的机制，我们使用了PI3K/Akt通路的特异性抑制剂，证实了PI3K/Akt通路对于SP细胞的存在和维持有重要作用。结论本研究证实了人胃癌细胞系中的确存在SP细胞，胃癌细胞系MGC-803中的SP细胞富集了肿瘤干细胞，具有干细胞的特征，包括高克隆形成能力，对化疗药物较高的耐药性，具有自我更新及多向分化潜能以及在小鼠体内的强致瘤能力。进一步的研究表明，PI3K/Akt通路对SP细胞的存在和维持具有重要作用。通过对胃癌细胞系中分离的SP细胞的研究，初步了解了胃癌干细胞的生物学特征。