归芪多糖的提取及药理学研究

来源 :兰州理工大学 | 被引量 : 5次 | 上传用户:zhuzhutoutuo
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当归和黄芪是甘肃省最常见的两种道地药材。现代药理研究表明,当归通过激活补体、增强免疫、刺激造血起到抗肿瘤、保肝利胆、清除氧自由基和抗炎等作用。黄芪具有强心降压、降血糖、抗应激、抗病毒、抗辐射、抗氧化等多种药理功效。多糖是一类具有广泛生物活性的生物大分子物质,存在于近百种植物中,它作为一类高效低毒的新型药物成分,倍受关注,已成为医药界研究的热门领域。本研究通过探索当归和黄芪中复合多糖的提取工艺,制备出含量较高的归芪多糖,并对其进行了体外药理活性(包括抗氧化、抑菌、抗肿瘤、抗病毒活性)和体内药效学(延缓机体衰老,抑制体内实体瘤和保护小鼠急性肝损伤)的研究,阐明归芪多糖药理作用的机制。以归芪多糖提取率为指标,通过单因素试验选取正交试验因素及水平,采用正交试验确定了归芪多糖的最佳提取工艺条件为提取温度90℃,提取时间为2h,料液比为1:10,当归和黄芪的质量比为1:5。依此方法得到的归芪多糖提取率为9.11%。通过研究归芪多糖、当归多糖、黄芪多糖和维生素C(VitC)清除羟基自由基、清除超氧阴离子自由基的能力、还原力和抑制油脂过氧化的能力来评价其体外抗氧化活性。结果提示,归芪多糖在体外具有较强的综合抗氧化能力,有些方面与阳性对照VitC无显著性差异。采用杯碟法和微量稀释法研究并比较了归芪多糖对6种供试菌株(大肠杆菌、地衣芽孢杆菌、肺炎球菌、绿脓杆菌、无乳链球菌、金黄色葡萄球菌)的抑制作用。结果表明:杯碟法与微量稀释法测得归芪多糖对大肠杆菌、肺炎球菌、金黄色葡萄球菌、地衣芽孢枯草杆菌的抑菌效果基本一致。采用MTT法,研究了不同浓度的归芪多糖在体外对人宫颈癌Hela细胞、人肝癌HepG2细胞和人肺腺癌A549细胞增殖的抑制作用。结果显示归芪多糖能不同程度的抑制Hela、HepG2和A549细胞的增殖,其抑制率呈现剂量依赖关系(62.5μg/mL1000μg/mL),与细胞对照组差异显著。以细胞存活率和病毒抑制率为指标,采用MTT法,研究不同作用方式下归芪多糖抑制人肠道病毒EV71增殖的作用、对EV71感染细胞后的阻断作用以及对EV71直接灭活的作用。结果显示:归芪多糖对EV71感染细胞的阻断作用,即先加入药物对病毒侵染的预防作用效果最好。在体内延缓衰老实验中,归芪多糖可能通过降低衰老小鼠血清H2O2、肝组织XOD和大脑MAO的活性,以及提高肝组织GSH-PX和皮肤组织中Hyp活性的机制起到一定的抗衰老作用。通过腋下接种小鼠肝癌H22细胞建立小鼠实体瘤模型,研究不同剂量的归芪多糖抑制实体瘤生长的作用效果,结果表明:归芪多糖可抑制肿瘤的生长,可能是通过提高机体免疫功能,增强免疫调节能力来实现的。通过四氯化碳(CCl4)建立小鼠急性肝损伤的动物模型,研究归芪多糖对小鼠急性肝损伤的保护效果。结果提示,归芪多糖能减轻CCl4致肝损伤的病理改变,显著降低CCl4致小鼠血清中ALT、AST及肝组织中MDA含量(p <0.01)和肝脏指数(p <0.01),提高SOD活性(p <0.01),对小鼠急性肝损伤有明显的降酶保肝作用。
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