油菜蜂花粉活性肽的制备及其抗疲劳活性研究

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研究目的:采用单因素实验确定油菜蜂花粉最佳破壁工艺,并对油菜蜂花粉活性肽的理化特性、对缺氧损伤细胞的影响、对小鼠运动能力的影响等方面进行研究,为油菜蜂花粉破壁工艺的优化和作为功能性食品的研究提供理论依据。研究方法:采用单因素方差分析和正交试验法确定油菜蜂花粉最佳破壁条件,将破壁后的蜂花粉进行酶解,采用SDS-PAGE凝胶电泳的方法分析发酵前后油菜蜂花粉蛋白和活性肽的分子量大小、采用Lowry法对活性肽溶解度进行测定、通过DPPH、ABTS自由基清除实验测定活性肽体外抗氧化能力;利用Co Cl2建立缺氧损伤模型,研究活性肽对缺氧损伤细胞的影响;最后给予小鼠灌胃不同剂量活性肽,研究其对小鼠运动能力的影响。研究结果:1.油菜蜂花粉最佳破壁工艺结果:乳酸菌液体发酵4天后,在超声波输出功率为480 W的条件下超声15min是破壁最佳条件,在此条件下蛋白质提取率达10.7%。2.油菜蜂花粉活性肽理化性质测定结果:经过酶解,油菜蜂花粉蛋白已被充分水解成小分子活性肽,发酵组溶解度显著高于未发酵组。3.抗氧化体外清除自由基实验结果:活性肽的自由基清除能力与活性肽含量呈正向相关性。4.油菜蜂花粉活性肽对缺氧损伤细胞的影响:发酵组的细胞存活率均高于未发酵组;当Co Cl2作用时间小于12h时,细胞存活率与活性肽浓度成正相关;Co Cl2作用时间越长,对细胞缺氧损伤的保护作用越弱。5.不同浓度油菜蜂花粉活性肽对小鼠运动能力的影响:油菜蜂花粉活性肽对小鼠体重无显著影响,长时间运动训练后,高浓度油菜蜂花粉活性肽可减少小鼠跑台掉落次数,提高小鼠的运动能力。研究结论:1.油菜蜂花粉最佳破壁条件为:乳酸菌液体发酵4天,超声功率为480 W,超声时间为15min。2.微生物发酵后的油菜蜂花粉活性肽具有更小的分子量和更好的水溶性,容易被生物体吸收。3.运动能力方面,活性肽具有良好的自由基清除能力、改善缺氧损伤、减少小鼠跑台掉落次数,由此得出油菜蜂花粉活性肽可有效缓解运动性疲劳,增强运动能力,可用于功能性食品的开发。
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