内含肽介导的重组鹅IFN-α在大肠杆菌中的可溶性表达及其抗病毒活性鉴定

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干扰素(Interferon,IFN)是由特定细胞产生的一类具有调节机体免疫功能、抗病毒、抗肿瘤等多种生物活性的分泌型糖蛋白,是机体防御系统的重要组成部分。近年来,由于干扰素具有无药物残留,无毒副作用的特点,使其在防治畜禽疫病特别是病毒性疫病方面越来越受到关注。但是鹅干扰素-α(GoIFN-α)的研究和应用相对落后,而GoIFN-α的在大肠杆菌中的表达更有待进一步研究。至今为止,大肠杆菌表达系统仍是表达IFN-α的首选系统。然而,IFN-α在大肠杆菌表达系统中多以无生物学活性的包涵体形式存在。因此,利用大肠杆菌表达系统表达出具有生物学活性的重组干扰素更具生产与应用价值。本研究综合几种有利于重组蛋白在大肠杆菌中可溶性表达的条件,构建了一系列表达载体,经对比分析,最终确立了重组GoIFN-α可溶性表达的方案:将GoIFN-α基因与内含肽SDI串联,并在其上游构建NusA标签,然后插入冷激表达载体pColdⅢ中,成功构建内含肽-冷激表达载体pColdⅢ-NusA-SDI-GoIFN-α,实现GoIFN-α融合蛋白的高效表达,为下一步重组GoIFN-α的纯化及其理化和生物学活性的研究奠定了基础,并对研制和生产新型抗病毒干扰素制剂具有深远的意义。
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