论文部分内容阅读
高脂血症是一种严重危害人类健康的全身脂质代谢异常疾病,是心脑血管疾病的重要危险因素,随着现代饮食和生活方式的转变,高脂血症已经成为全球性公共卫生问题。目前以化学药物治疗为主,但存在多种严重不良反应。开发安全、有效、不良反应少的天然降血脂药物意义重大。壳聚糖(CTS)是从虾蟹壳中提取出的带正电荷的碱性多糖,具有良好的生物相容性和生物可降解性,大量体内外实验证明壳聚糖具有良好的降脂和减肥活性。但其水溶性差需大剂量服用,易产生恶心、呕吐和便秘等副作用。课题组成员前期将其制备成分散性好、利用度高的壳聚糖微球(CTMS)以及载辣椒碱的壳聚糖微球(CCMS),达到了增强活性和降低副作用的目的。壳寡糖(COSII和COSI)和氨基葡萄糖(GLC)是壳聚糖的降解产物,水溶性高、易吸收且无毒副作用。本实验研究CTS及相关产物对油酸诱导的HepG2细胞内脂质堆积的作用,MTT法确定安全给药浓度范围,油红O染色后观察细胞形态和脂滴分布,提取油红O定量脂质含量,测定细胞内TG含量。结果表明,CTS、CTMS、CCMS、COSII、COSI和GLC均可有效抑制HepG2细胞内的脂质堆积,显著降低细胞内TG含量,呈剂量依赖性。采用高脂饮食诱导高脂血症大鼠模型,研究CTS及降解产物的降脂药效活性。结果表明,CTS、COSII和GLC可不同程度的减缓高脂血症大鼠的体重、脂体比、Lee’s指数、脏器指数的增长,抑制脂肪细胞的生长,具有一定的减肥活性,呈剂量依赖性;可显著降低血清TC、TG和LDL-C含量;减少肝脏中TC和TG含量、增加总胆汁酸(TBA)含量,促进粪便中TC、TG和TBA的排泄,发挥降脂作用。COSII、GLC可不同程度的提高高脂血症大鼠SOD酶活性,具有抗氧化作用。CTS、COSII和GLC可显著降低高脂血症大鼠血清和肝脏中AST、ALT的含量,不同程度地缓解脂肪肝症状,具有保肝护肝作用。为进一步研究CTS及相关物质降脂活性的作用机理,通过Western Blot技术检测其对HepG2细胞内脂质代谢相关的肝脂酶(HL)和过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)的蛋白表达。结果显示,CTMS可促进HepG2细胞内HL蛋白和PPARα蛋白的表达,而CTS、CCMS、COSII、COSI和GLC对其表达基本无影响;抑制PPARα基因表达,可显著抑制HL蛋白表达,表明CTMS促进HL蛋白表达与PPARα基因有关;在高TC、TG条件下,CTMS干预后对HL蛋白和PPARα蛋白表达均有促进作用,抑制PPARα基因后,上述作用消失,说明CTMS促进HL蛋白表达影响可能是先通过促进PPARα表达实现。