益气化瘀清热方治疗激素敏感型肾病综合征的临床观察及其对足细胞相关蛋白podocin的表达影响

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目的:通过临床观察益气化瘀清热方治疗小儿激素敏感型肾病综合征的疗效,为临床用药提供科学依据。方法:收集河南中医学院第一附属医院和郑州市儿童医院的激素敏感型肾病综合征患儿的病例,观察其在治疗前及治疗后2周、4周、8周、12周、24周及36周的24h-UTP、ALB、TG、CHOL、IgG、FIB、PT、激素相关副作用及血常规、肝肾功相关安全指标,通过统计学分析了解两组的差异。结果:①疗程2周治疗组临床疗效优于对照组(P<0.05);②治疗组复发率为9.4%,对照组复发率为32.4%,前者明显低于后者(P<0.05);③疗程2周起治疗组在降低24-UTP及升高ALB、IgG方面优于对照组(P<0.05);④疗程4周时治疗组在降低CHOL及延长PT方面明显优于对照组(P<0.05);⑤治疗前后在TG和FIB方面各观察时间点两组间比较无差异(P>0.05);⑥治疗组在降低感染频次、减少汗出及急躁积分方面优于对照组(P<0.05),但对满月脸及水牛背无明显作用(P>0.05)结论:①益气化瘀清热方具有降低尿蛋白和升高血浆白蛋白、IgG的作用且在2周内起效;②益气化瘀清热方具有降低胆固醇、FIB和延长PT的作用,且在4周内起效;③益气化瘀清热方具有提高机体免疫功能、降低复发率、感染频次及减轻激素引起的汗出和急躁程度的作用,但其对激素引起的水牛背及满月脸无作用。目的:通过嘌呤霉素氨基核苷(PAN)刺激诱导体外培养小鼠足细胞损伤模型,观察益气化瘀清热方及其拆方对小鼠足细胞表达podocin的影响,探讨益气化瘀清热方对足细胞损伤的作用机理。方法:体外培养足细胞,通过实时荧光定量PCR检测不同天数和不同浓度PAN刺激足细胞podocin mRNA的表达情况确立模型建立的最佳时间及PAN的浓度;并利用PAN诱导足细胞损伤模型随机分为益气组、化瘀组、清热组、复方组、雷公藤组、对照组、模型组及控制组,分别予各类含药血清进行培养24h及48h后,采用实施荧光定量PCR及Wersten Blot技术检测各组对足细胞podocin mRNA及其蛋白的表达结果:①足细胞podocin mRNA的表达量在第7、8天高于4、5、6、9天(P<0.05),第7天与第8天无明显差别(P>0.05)。②不同浓度PAN损伤足细胞除刺激24h时50ug/ml与75ug/ml浓度的podoicn mRNA无差异(P>0.05)外,其余提示podocin mRNA的表达量随浓度的增加而降低(P<0.05)。③各组干预24h后复方组、雷公藤组podocin mRNA的表达量高于对照组(P<0.05),但雷公藤组与复方组无明显差异(P>0.05);益气组、化瘀组、清热组与对照组比较无差异(P>0.05)。④各组干预48h时化瘀组、清热组、复方组和雷公藤组podoicn mRNA表达量高于对照组(P<0.05),其中复方组和雷公藤组作用无差异(P>0.05),但两组作用优于清热组及化瘀组(P<0.05),而清热组与化瘀组之间无差异(P>0.05);益气组与对照组比较无差异(P>0.05)。⑤各组干预24h时益气组、清热组和复方组podocin蛋白表达量均高于对照组(P<0.05),其中复方组作用强于清热组和益气组(P<0.05),而益气组与清热组无差异(P>0.05);化瘀组与对照组无差异(P>0.05)。⑥各组干预48h复方组、化瘀组podocin蛋白的表达量高于对照组(P<0.05),但复方组与化瘀组作用相当(P>0.05);益气组、清热组与对照组无差异(P>0.05)。结论:①本实验的模型条件设立在50ug/ml的PAN刺激,于第7天提取细胞总RNA;②对于PAN刺激24h后复方组对podocin mRNA及蛋白表达降低有一定的上调作用;益气组与清热组对podocin蛋白的表达上调有一定的作用,但对podocin mRNA表达上调无效;化瘀组对podocin mRNA及其蛋白表达上调均无作用;③对于PAN刺激48h后复方组、化瘀组对上调足细胞损伤podocin mRNA和podocin蛋白表达降低有一定作用,清热组对podocin mRNA的表达有一定的上调作用,但对podocin蛋白的表达无明显的上调作用,益气组对两者的表达均无明显上调功效;此外,复方组的作用总体上优于化瘀组和清热组
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