溶解促进荧光增强的有机小分子探针在蛋白质检测方面的应用

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荧光分析法由于具有灵敏度高、简单易操作和响应快速等优点在环境监测、食品安全、疾病诊断等领域得到广泛应用。近年来,它在医疗保健领域中成为检测生物分子的一种重要手段。蛋白质作为细胞、生物组织和器官不可或缺的物质之一,在生命活动中发挥着关键作用,蛋白质的缺乏或病变会导致许多疾病发生甚至引起死亡。所以用荧光分析法检测蛋白质备受研究者的关注。其中,有机小分子荧光探针因其分子量小、易于合成、易于修饰等优点,已成为荧光分析法中常用的荧光材料。但目前已报道的小分子荧光探针仍存在一些问题,如:这些探针含有金属离子,或者需要在有毒的有机溶剂中测试,对环境不友好。而且大多数已报道的探针是基于AIE型的分子设计的,种类单一。因此本文主要研究新型有机小分子探针在生物蛋白质检测中的应用,揭示了其内在优势,对其作用机理提出了新见解。本文开发了一种有机小分子1,3,6,8-四(4-羧基苯基)芘(TBAPy),作为荧光“开启”(turn on)探针,用于选择性检测水中的碱性蛋白质——鱼精蛋白。当鱼精蛋白水溶液加入到TBAPy荧光探针分散液中,体系的荧光强度增强约40倍,且由原来的无荧光变成明亮的绿色荧光,最低检测限为24.14 ng m L-1。TBAPy/鱼精蛋白系统可以进一步用作“on to on”探针检测肝素。肝素的加入导致体系荧光进一步增强,同时荧光颜色从绿色变为蓝色。产生这种现象的原因可以通过溶解促进荧光增强(DEE)来解释,即不溶性TBAPy探针被去质子化形成阴离子物质并溶解在水中,由于阴离子物质间的静电排斥作用抑制了聚集荧光淬灭现象(ACQ),导致荧光增强。这种DEE现象不同于以往广泛报道的聚集诱导发光(AIE)现象。DEE机制的提出为新型荧光探针的设计提供了新思路,有望在生物传感、健康检测等领域发挥重要作用。
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