【摘 要】
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γ-羟基丁酸(γ-hydroxybutyric acid,GHB)自20世纪60年代开始在临床中使用,因具有麻醉、迷幻、成瘾等作用受到人们的广泛关注。近年来,由GHB引发的药物辅助性犯罪(drug facilitated sexual assault,DFSA)案件日益增多,公安机关需要通过检测案件检材中GHB的含量来判定检材供体是否摄入GHB。GHB是生物样本中的内源性物质,其含量分析与判定十分
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γ-羟基丁酸(γ-hydroxybutyric acid,GHB)自20世纪60年代开始在临床中使用,因具有麻醉、迷幻、成瘾等作用受到人们的广泛关注。近年来,由GHB引发的药物辅助性犯罪(drug facilitated sexual assault,DFSA)案件日益增多,公安机关需要通过检测案件检材中GHB的含量来判定检材供体是否摄入GHB。GHB是生物样本中的内源性物质,其含量分析与判定十分复杂。目前国内法庭科学领域对生物样本中GHB含量的研究较少,缺乏足够的含量及阈值数据作为此类案件的判定依据。本文旨在建立血液中GHB的气相色谱-四极杆飞行时间串联质谱(GC-Q-TOF/MS)分析方法,进而准确检测死后血液样本中GHB的内源性含量,为GHB相关案件提供分析方法及关键数据参考。本研究对GC-Q-TOF/MS的色谱条件和质谱条件进行了优化,确定了标准溶液中GHB检测的最佳仪器条件;优化和比较了沉淀蛋白法、液液萃取法和固相萃取法等三种前处理方法,确定了血液中GHB的最佳前处理方法;引入了内源浓度自动校正工具,解决了配制工作溶液缺乏空白样本的问题,建立了血液中GHB的GC-Q-TOF/MS分析方法;利用所建立的方法准确检测了205个死后血液样本中GHB的内源性含量,通过统计分析样本数据,为确定GHB阈值提供数据支撑。结果表明,GHB的定量离子为233.1028,定性离子为204.0997、117.0365、73.0467,内标物(GHB-d6)的定量离子为239.1395,定性离子为206.1395、120.0551、73.0466。标准溶液中GHB的浓度在0.01~60 mg/L范围内线性关系良好(R~2=0.9972),检出限和定量限分别为0.005和0.01 mg/L,日间相对标准偏差(RSD)小于2.7%,日内RSD小于6.8%。因液液萃取法在提取效率、重现性、基质净化效果等方面均优于沉淀蛋白法与固相萃取法,故液液萃取法为血液中GHB的最优前处理方法。血液中GHB的加标浓度在0~60 mg/L的范围内线性关系良好(R~2=0.9962),检出限和定量限分别为0.03和0.15 mg/L,日内RSD小于2.8%,日间RSD小于10.0%,提取回收率为74.4%~82.7%,基质效应为101.1%~109.7%,内源浓度自动校正工具适用于血液中内源GHB浓度的校正。205个死后血液样本中GHB的含量范围为1.3~99.7 mg/L,中位数M(P25~P75)为9.0(5.3~19.0)mg/L。经统计分析,94.1%样本的GHB含量均在所推荐阈值50 mg/L以内,在一定程度上支持了该阈值,实验样本的性别、年龄及死亡方式均与案例死后血液中GHB含量无关联,但死者生前摄入毒物毒品的情况可能对死后血液中GHB的含量水平产生影响。本文建立血液中GHB的GC-Q-TOF/MS分析方法可应用于实际案件的检测,所获得的样本数据可为相关案件侦破提供参考。
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