芽孢杆菌液体发酵条件优化及在养殖水体中试验效果研究

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本文对蜡样芽孢杆菌DLSL-2和枯草芽孢杆菌XF-1的液体发酵条件、最优发酵培养基及其在养殖水体中的试验效果进行了研究。 通过摇瓶单因子多水平和均匀设计法试验对蜡样芽孢杆菌DLSL-2菌株进行试验研究,最后确定其液体发酵的最佳基本发酵条件和培养基为:初始pH值7.0,培养温度30℃,转速250r/min,接种量5.6%,培养基组分为:黄豆饼粉4.88g,玉米淀粉1.45g,酵母膏1.78g,K2HPO40.11g,CaCl20.01g,MgSO4 0.15g,MnSO40.01g,蒸馏水100mL,预测活菌数最优结果为:7.5×109cfu/mL,验证试验实测值平均为7.1×109cfu/mL,而在未优化发酵培养基中蜡样芽孢杆菌活菌数为3.2×109cfu/mL,筛选出的最优培养基配方产活菌数是未优化培养基配方的220%。 通过摇瓶单因子多水平和响应面(RSM)法试验对枯草芽孢杆菌XF-1最优液体发酵条件和培养基的研究,确定其液体发酵的最佳基本发酵条件和培养基为:初始pH7.2~7.5,培养温度37℃,摇瓶转速250r/min,接种量6%,培养时间22h,培养基组分为:玉米淀粉2.53g,黄豆饼粉4.95g,酵母膏1.30g,K2HPO40.11g,CaCl20.01g,MgSO40.15g,MnSO40.01g,蒸馏水100mL,此时可得到预测XF-1发酵液活菌数为:25.9×109cfu/mL。验证试验实测值为:24.5×109cfu/mL,而在未优化培养基条件下的发酵液活菌数为9.8×109cfu/mL,筛选出的最优培养基配方产活菌数是未优化配方的250%。 应用两种芽孢杆菌对养殖水体中各项水质因子进行控制和处理,实验接种菌液量为5mL/m3。结果表明:芽孢杆菌能显著降低养殖试验池NH4+-N、NO2--N、COD等污染物浓度。使用效果表明:在投加芽孢杆菌菌液30d后,水质各项指标均优于未投加菌液的对照池,投加混合芽孢杆菌菌液作用效果好于单株芽孢杆菌使用效果,NH4+-N、NO2--N、COD污染物的去除率分别是:99.16%、97.86%和78.72%,明显改善养殖水体水质条件。
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