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车前子在我国资源丰富,我省吉安、吉水、泰和一带是大粒车前子的主产地,年产量上千吨,产品每年出口量达上百吨。我国临床和民间多取其利尿之效用于小便淋漓不畅之症,而将种皮中所含的大量粘液质(主要成分为多糖)视为杂质弃而不用。目前国外将其种皮制成各种保健食品,证明其具有润肠通便、降血压、调节血脂、预防动脉粥样硬化的保健作用。因此本文以吉安大粒车前子及其麸壳为原料,分别用热水、0.5M NaOH溶液对其进行提取得到4种多糖。并对其提取、分离纯化及结构特征进行了比较系统的研究,在此基础上对车前子水提精制多糖的硫酸化修饰进行了初步的探讨。现将主要研究内容概括如下：1.优化了大粒车前子水提多糖制备的工艺条件；通过响应面分析得出最佳的提取条件再结合实际操作将其确定为：提取温度为99℃,料液比为1：30,提取时间为5.45h。实际测得多糖得率为13.79%,与理论预测值相比相对误差为6.67%。因此,此法得到的最优提取优化条件参数准确可靠,具有一定实用价值。2.分离得到了一个水提多糖的组分并对其结构进行了初步解析；采用SephacrylTMS-400HR葡聚糖凝胶层析柱(5.5x60cm)对大粒车前子水提精制多糖进行了纯化,得到一个多糖组分,经HPLC鉴定其为均一组分,将之命名为WE-PLP (Water Extracted Polysaccharide of Plantago asiatica L.)。HPGPC法测定其相对平均分子量(Mw)为1762kDa；对其理性性质进行分析,结果表明其中含多糖87.32%,蛋白质0.98%,糖醛酸17.85%；单糖组成表明,WE-PLP是一种杂多糖,主要阿拉伯糖(Ara)、木糖(Xy1)、葡萄糖(Glc)、半乳糖(Gal)组成,摩尔比值为1.00：4.68：0.23：0.18,对其进行糖醛酸还原后,发现其摩尔比变为1.00：4.59：0.50：0.18；对其进行紫外分析发现,WE-PLP在280nm左右具有特征吸收；红外光谱分析显示,WE-PLP具有多糖和蛋白的特征吸收,结构中存在β-型吡喃糖环；甲基化分析发现：WE-PLP中的木糖主要以1,4-linked Xylp、1,2,4-linked Xylp、1,3,4-linked Xylp形式存在,这三者所占比例很大。3.对大粒车前子水提精制多糖硫酸酯化工艺进行优化,单因素实验确定最佳酯化条件为： V氯磺酸/V吡啶为1/2,水浴温度为80℃,反应时间为3h；从红外光谱的吸收峰分析中,可以看出经过硫酸酯化的多糖在1255cm-1和820cm-1附近都有吸收峰,证明硫酸基已与车前子多糖结合成酯,随着酯化试剂比例的减小,酯化程度越来越小。4.采用0.5M NaOH溶液对水提后的车前子干燥残渣进行多糖提取并进一步研究了其结构；用0.5M NaOH溶液提取得到精制多糖AE-PLCP (Alkaline Extracted Crude Polysaccharide of Plantago asiatica L.),其理化性质分析发现：其多糖含量为82.84%,蛋白含量为0.68%,糖醛酸含量为20.50%；GC分析发现AE-PLCP由Rha、Ara、Xy1、Glc、Gal5种单糖组成,其摩尔比为1.00：15.41：63.95：1.29：2.58；对其进行糖醛酸还原后,其摩尔比变为1.00：15.50：63.54：4.02：3.94；紫外扫描发现,AE-PLCP在280nm具有吸收；红外扫描发现其具有多糖和蛋白质的特征吸收；甲基化分析发现：E-PLCP主要由T-linked Araf、T-linked Xy1p,1,3-linked Araf、1,3-linked Xy1p、1,4-linked Xylp、1,2,4-linked Xylp和1,3,4-linked Xylp等残基组成。Xyl主要以1,4-linked Xylp、1,2,4-linked Xylp、1,3,4-linked Xylp形式存在。5.对大粒车前子麸壳水提多糖的结构进行了初步探讨；通过SephacrylTMS-400HR葡聚糖凝胶层析柱(2.4×60cm)对大粒车前子麸壳水提精制多糖进行纯化后,得到一个多糖组分,对这个组分进行鉴定发现其为均一组分,称为WE-PLHP(Water Extracted Polysaccharide of Plantago asiatica L. Husk)。 HPGPC法测得WE-PLHP发现其相对平均分子量Mw为619,651Da；基本理化性质测定发现,其多糖含量为71.42%,且含有6.07%蛋白质和20.74%的糖醛酸含量；进一步GC分析发现WE-PLHP是一种主要由5种单糖组成的杂多糖,分别是：Rha、Ara、Man、Glc、Gal,其摩尔比为2.24：1.87：1.00：3.24：3.49；对其进行糖醛酸还原后,发现其摩尔比变成2.27：1.81：1.00：3.28：10.73；通过红外光谱分析显示,WE-PLHP具有多糖和蛋白质的特征吸收,且结构中存在p-型吡喃糖环;甲基化分析结果表明WE-PLHP中葡萄糖有T-linked Glcp,1,3-linked Glcp,1,6-linked Glcp和1,3,6-linked Glcp四种连接方式；半乳糖有T-linked Galp,1,3-linked Galp,1,4-linked Galp,1,6-linked Galp和1,3,6-linked Galp五种连接方式；鼠李糖有T-linked Rhap和1,2-linked Rhap两种连接方式；阿拉伯糖有T-linked Araf,1,3-linked Araf,1,5-linked Araf三种连接方式和木糖有T-linked Xylp,1,4-linked Xylp和1,2,4-linked Xylp三种连接方式。其中Gclp和Galp所占比例很大,部分支链残基(1,2,4-linked Xylp、1,3,6-linked Glcp、1,3,6-linked Galp)表明其具有一定的分支。6.对大粒车前子麸壳碱提多糖的结构进行了初步探讨;采用.SephacrylTM-400HR葡聚糖凝胶层析柱(2.4x60cm)对大粒车前子麸壳碱提精制多糖进行纯化后,也得到一多糖组分,经HPLC鉴定其为均一组分AE-PLHP (Alkaline Extracted Polysaccharide of Plantago asiatica L. husk)。并测得其相对分子量Mw为498,217Da;对其理化性质分析发现其含有多糖59.19%,蛋白质6.04%,糖醛酸10.80%；对其进行GC分析发现AE-PLIHP是一种由Rha、Ara、 Xy1、Man、Glc和Gal六种单糖构成的杂多糖,其单糖组成摩尔比为2.46：1.78：4.78：1.00：24.38：2.52；进行糖醛酸还原后,其单糖组成摩尔比变为2.31：1.71：4.69：1.00：23.92：3.90；通过红外光谱分析显示,AE-PLHP具有多糖和蛋白质的特征吸收,而且结构中存在p-型吡喃糖环。甲基化分析结果表明AE-PLHP中葡萄糖有T-linked Glcp,1,2-linked Glcp,1,3-linked Glcp,1,6-linked Glcp和1,3,4,6-linked Glcp五种连接方式；木糖有T-linked Xylp,1,4-linked Xylp,1,2,4-linked Xylp和1,3,4-linked Xylp四种连接方式；半乳糖有T-linked Galp,1,6-linked Galp,1,2,3-linked Galp,1,3,6-linked Galp,1,2,3,6-linked Galp和1,3,4,6-linked Galp六种连接方式；阿拉伯糖有T-linked Araf和1,3-linked Araf两种连接方式；鼠李糖有T-linked Rhap和1,2-linked Rhap两种连接方式；甘露糖有1,3,4,6-linked Manp。其中葡萄糖残基和木糖残基所占比例很大,部分支链残,基表明其具有一定的分支程度。此外还检测到其他少量残基。