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目的：胰腺癌是常见的消化系统恶性肿瘤之一，其发病率有逐年上升的趋势。早期诊断困难，手术切除率低，预后差，1年生存率低于17％，5年生存率仅为3％左右，是消化系统恶性肿瘤中预后最差的一种。原因之一为胰腺癌的侵袭和转移特性，而侵袭和转移与VEGF家族有关。其中血管内皮生长因子D(VEGF-D)是VEGF家族的新成员，不仅在人体许多正常组织中存在，在多种肿瘤细胞内也有表达，在肿瘤的侵袭、转移方面有着重要的作用。研究表明VEGF-D诱导淋巴管生成，促进癌细胞淋巴扩散，又被称为淋巴管内皮生长因子。VEGF家族的表达与多种细胞因子密切相关。白细胞介素2、6(IL-2、IL-6)是人体中常见的炎症介质，具有非常复杂的生物学功能，可以通过影响细胞的粘附力、活动力、血栓形成、肿瘤特异性抗原的表达及肿瘤细胞的增殖而影响肿瘤的进展，其生物学特性与VEGF家族的表达息息相关。本实验采用逆转录聚合酶链反应技术(reverse transcription polymerase chain reactin，RT-PCR)分析IL-2及IL-6刺激胰腺癌细胞株前后VEGF-D mRNA的表达，探讨其对人胰腺癌细胞VEGF-D表达的调节，进一步明确胰腺癌侵袭及转移的机制，为探讨胰腺癌新的治疗途径提供实验基础。
方法：人胰腺癌细胞株SW1990及BXPC-3在37℃，5％CO2的饱和湿度的无菌培养箱、RPMI 1640培养基中培养(含有10％胎牛血清、100U/ml青霉素和100U/ml链霉素)。细胞株复苏、传代、细胞成稳定对数生长后，将培养液更换为含0.1％胎牛血清的RPMI 1640培养基继续培养12小时，以消除血清对细胞增殖的影响。分别更换为含有0.1、1、10、100μg/L的IL-2或IL-6的0.1％胎牛血清的培养基作为实验组，分别培养4、8、12、24小时，以加入等剂量的磷酸钠盐缓冲液(PBS)作为对照组，定时收取细胞后以Trizol-步法提取刺激前后总RNA，以VEGF-D mRNA为模板，用RT-PCR技术测定刺激前后胰腺癌细胞VEGF-D基因含量，以β-actin作为内参照标准，分析刺激前后胰腺癌细胞株VEGF-D mRNA的表达。实验数据采用SPSS 13.0统计分析软件进行分析。
结果：
1、IL-2对胰腺癌细胞株SW1990表达VEGF-DmRNA的影响。
以不同浓度的IL-2刺激后，与对照组相比，VEGF-D的扩增产物电泳条带亮度成不同程度的减低；各实验组VEGF-D mRNA的表达量均低于对照组的VEGF-D mRNA的表达量，并在0.1～100μg/L范围内与浓度成反比(P＜0.05)。在同一浓度下，不同作用时间的VEGF-D mRNA的表达量无明显变化(P＞0.05)。可见，IL-2抑制胰腺癌细胞株SW1990VEGF-D mRNA表达，并在0.1～100μg/L范围内随浓度的增加，抑制作用逐步增强，但与作用时间无明显关系。
2、IL-2对胰腺癌细胞株BXPC-3表达VEGF-D mRNA的影响。
以不同浓度的IL-2刺激后，与对照组相比，VEGF-D的扩增产物电泳条带亮度成不同程度的减低；各实验组VEGF-D mRNA的表达量均低于对照组的VEGF-D mRNA的表达量(P＜0.05)，0.1μg/L与1μg/L实验组之间VEGF-DmRNA的表达无统计学差异(P=0.179)，10μg/L与100μg/L实验组之间VEGF-D mRN,A的表达无统计学差异(P=0.116)。各实验组同一浓度下不同作用时间的VEGF-DmRNA的表达量无明显变化。可见，IL-2抑制胰腺癌细胞株BXPC-3 VEGF-D mRNA表达，但是与作用时间无明显关系。 3、IL-6对胰腺癌细胞株SW1990表达VEGF-D mRNA的影响。
以不同浓度的IL-6刺激后，与对照组相比，除0.1μg/L实验组，VEGF-D的扩增产物电泳条带亮度成不同程度的增加，VEGF-D mRNA的表达量均高于对照组的VEGF-D mRNA的表达量(P＜0.05)，1μg/L实验组与作用时间呈正相关(P＜0.05)，10μg/L、100μg/L实验组与作用时间无明显相关关系(P＞0.05)。可见，IL-6促进胰腺癌细胞株SW1990VEGF-D mRNA表达，10μg/L实验组与作用时间呈正相关。
4、IL-6对胰腺癌细胞株BXPC-3表达VEGF-D mRNA的影响。
以不同浓度的IL-6刺激后，与对照组相比，VEGF-D的扩增产物电泳条带亮度无明显变化，各实验组与对照组相比无明显差异。各浓度下不同作用时间无明显差异(P＞0.05)。IL-6对胰腺癌细胞株BXPC-3表达VEGF-D mRNA无明显影响。
结论：
1、IL-2抑制胰腺癌细胞的VEGF-D mRNA的表达，从而抑制胰腺癌淋巴结转移。
2、IL-6促进某些(如伴有慢性胰腺炎)胰腺癌细胞的VEGF-D mRNA的表达，但对某些胰腺癌细胞生物学特性的影响有待于进一步深入研究。