前言 高血压病是最常见的心血管疾病，然而目前对于高血压病的发病机制尚不十分了解。高血压病是一种复杂的多基因疾病，是由多个基因的累加作用和环境因素共同作用所引起的，这些基因的SNP及其特定组合可能是造成疾病易感性最重要的原因，对疾病相关调节通路的候选基因进行SNP的关联研究，可能是高血压病、糖尿病和癌症等多基因疾病研究取得突破的希望所在。 β-AR在调节血压及心血管疾病发生中发挥着重要作用，是高血压病的重要候选基因。我们应用PCR-RFLP方法对中国东北高血压病高发地区相对独立人群中高血压病患者和正常人系统地检测了β-AR基因家族3个亚型基因的四个cSNP的分布频率，进行病例-对照分析，探讨四个多态位点在我国东北高血压病高发地区人群中的意义。同时构建β₁-AR基因真核细胞表达载体，通过细胞转染及AC活性检测初步研究两个cSNP不同基因型对基因功能的影响。 实验材料与方法 实验材料 1．细胞培养相关试剂 2．COS7细胞系 3．基因克隆相关分子生物学试剂 4．细胞转染试剂盒 5．放免试剂盒 实验方法 用PCR-RFLP对高血压病患者和正常人进行β-AR基因家族3个亚型基因的四个cSNP的基因分型，高血压病组及正常对照组基因型频率应用χ²检验，进行病例-对照分析。同时检测各指标，应用t检验进行分析。构建β₁-AR基因真核细胞表达载体，利用脂质体法转染COS7细胞，以异丙肾上腺素作为刺激因素，放免检测细胞内‘251一cAMP浓度，间接检测AC活性。结果 p，一AR Ars389Gly位点的基因型频率在高血压病组与正常对照组差异有统计学意义，Gl妙gser位点的基因型频率在高血压病组与正常对照组有显著差异;pZ一AR Arg16GIy位点和p3一ART]甲64Arg位点的基因型频率在两组间没有显著差异。四个位点的基因型频率和等位基因频率与各指标无相关性。成功构建了在日，一AR基因Ar扩89Glv位点和Gl抖gser位点有不同基因型组合的PcDNA3 .1表达载体，通过细胞转染，结果发现在无激动剂作用时，转染Gly3 89纯合子基因的细胞内的cAMP浓度高于转染Ars389纯合子基因的细胞，而在有激动剂作用时，结果正相反;无论有无激动剂作用，转染Ser49纯合子基因的细胞内的cAMP浓度均高于转染Gl抖9纯合子基因的细胞。结论 1.p，一AR基因Arg389Gly位点和Ser49Gly位点的基因型频率与高血压病相关，Gly389纯合子和Ser49纯合子个体易感高血压病。日2一ARArg16Gly位点和日。一AR场64一g位点基因型频率和等位基因频率与高血压病不相关。四个位点的基因型频率和等位基因频率与各指标无相关性。 2.在无激动剂作用时，日、一AR基因Gly389纯合子个体AC活性高，而在有激动剂作用时，Ar妇89纯合子个体AC活性高。无论有无激动剂作用，Ser49纯合子个体AC活性均高。