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目的通过合理配伍将葡萄籽提取物、天然维生素E和富硒酵母三种天然抗氧化物质制成复合制剂,并采用动物试验及人群试验相结合,系统的研究其食用安全性和抗氧化作用效果,为其作为一种复合型抗氧化制剂的开发和应用提供科学依据,为科学地开发和利用三种天然抗氧化物质提供重要的研究基础。方法1.通过总抗氧化能力检测比较葡萄籽提取物、天然维生素E、富硒酵母不同配伍的抗氧化能力,选择优势配伍比例按保健食品的生产工艺要求制成复合制剂,并检测分析复合制剂的卫生学指标、功效成分含量及稳定性。2.采用小鼠急性经口毒性试验、三项遗传毒性试验和30天喂养试验进行复合制剂的毒理学安全性评价。3.使用不同剂量的复合制剂经口灌胃给予老龄NIH小鼠30天,观察复合制剂对老龄小鼠抗氧化能力的影响。4.选择40-65岁的自愿受试者连续服用复合制剂3个月,观察复合制剂对人体抗氧化能力的影响。结果1.通过总抗氧化能力检测发现葡萄籽提取物、天然维生素E和富硒酵母按20:3:2的比例配伍时总抗氧化能力具有明显优势,采用该配伍比例制成复合制剂后,其含有的主要功效成分原花青素、维生素E、硒在三个月加速试验中均具有良好的稳定性,且其卫生学指标均符合食品安全国家标准的要求。2.葡萄籽提取物、维生素E、硒复合制剂急性经口毒性LD50>20.0g/kg BW,属无毒级物质;小鼠骨髓细胞微核试验、小鼠精子畸形试验和Ames试验三项遗传毒性试验均未发现复合制剂具有遗传毒性;30天喂养试验显示复合制剂对SD大鼠体重、食物利用率、脏器重量、血常规、肝肾功能及糖脂代谢均无明显影响,大鼠主要脏器的大体解剖及组织病理检查也均未见异常。3.老龄NIH小鼠经口灌胃给予葡萄籽提取物、维生素E、硒复合制剂30天后,与对照组相比,0.10和0.30g/kg BW剂量组小鼠血清MDA和蛋白质羰基含量明显下降(P<0.05),GSH含量、SOD活力和GSH-Px活力均明显升高(P<0.05)。4.试验组研究对象按0.62g/天连续服用葡萄籽提取物、维生素E、硒复合制剂3个月后,试验组自身前后比较及与对照组相比,研究对象血清MDA含量明显降低(<0.05),而SOD活力和GSH-Px活力均明显升高(P<0.05),且试验组研究对象血清MDA含量下降率、SOD活力的升高率及GSH-Px活力升高率也均明显高于对照组(P<0.05)。结论1.葡萄籽提取物、天然维生素E和富硒酵母三种抗氧化物质按20:3:2比例配伍时总抗氧化能力具有明显的优势,采用该配伍比例制成的葡萄籽提取物、维生素E、硒复合制剂的卫生学指标及稳定性均良好。2.葡萄籽提取物、维生素E、硒复合制剂具有较好的食用安全性,且能显著提高老龄小鼠的抗氧化能力。3.每天补充0.62g葡萄籽提取物、维生素E、硒复合制剂可明显增强40-65岁人群的抗氧化能力。4.葡萄籽提取物、维生素E、硒复合制剂适合作为一种复合型抗氧化制剂开发和应用。