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目的 观察在大鼠心肌梗塞后不同时期进行骨髓间充质干细胞缺血心肌移植,对大鼠的心功能和缺血心肌组织毛细血管新生作用的影响,以及移植细胞在宿主体内存活、分化的情况,以探讨心肌梗塞后细胞移植治疗的最佳时间窗。 方法 将成年雄性近交系Wistar大鼠85只随机分为假手术组(n=6)和建模组(n=79)。后者用结扎左冠状动脉前降支的方法建立心肌梗塞模型。分别从心电图、组织形态学、心功能(左室收缩压、左室发展压、±dp/dtmax、心率)方面对建模组动物和假手术组动物进行比较,评估模型效果。随后,将剩余的已成功建立心肌梗塞模型的54只大鼠随机分成移植对照组(DMEM组,n=24)、细胞移植组(MSC组,n=24)、骨髓采集组(n=6)。无菌解剖骨髓采集组大鼠的股骨、胫骨和肱骨,常规抽取骨髓,分离骨髓间充质干细胞,经体外培养扩增后制备细胞悬液。将已用荧光染料DAPI进行过细胞核标记的骨髓间充质干细胞(0.15ml含1×106个细胞)分别于建模后1小时(MSC-1组,n=8)、2周(MSC-2组,n=8)和4周(MSC-3组,n=8),直接注射入细胞移植组动物梗死心肌组织边缘区。移植对照组用同样方法分别于建模后1小时(DMEM-1组,n=8)、2周(DMEM-2组,n=8)和4周(DMEM-3组,n=8)注射等量(0.15ml)培养液。所有MSC组和DMEM组动物于移植手术后4周处死,用免疫荧光法观察移植细胞在体内存活、分化情况,计算心梗边缘区毛细血管密度,用RT-PCR方法测定心梗边缘区VEGF的表达,用非循环式langendorff模型检测左室血流动力学指标(左室收缩压、左室发展压、±dp/dtmax),评价心脏功能改善效果。