【摘 要】
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第一部分:非综合征学语前聋常见致聋基因突变检测目的探讨中国人非综合征学语前聋患者常见的几种致聋基因myosin 7a、myosin 15a、a-盖膜蛋白、SLC26A4和OTOF基因的突变频率
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第一部分:非综合征学语前聋常见致聋基因突变检测目的探讨中国人非综合征学语前聋患者常见的几种致聋基因myosin 7a、myosin 15a、a-盖膜蛋白、SLC26A4和OTOF基因的突变频率和特点.方法收集非综合征学语前聋家系34个,大部分来自湖南地区,共计65例,散发病人31例,健康对照组100例.采用患者外周血提取基因组DNA后,聚合酶链反应扩增myosin 7a、myosin 15a、a-盖膜蛋白、SLC26A4和OTOF基因的部分外显子,单链构象多态性分析初筛可疑突变者,发现异常构象带后再行DNA测序确定是否突变.第二部分:浆膜蛋白RTN1和RTN4基因在小鼠内耳的表达目的探讨浆膜蛋白RTN1和RTN4基因在小鼠内耳的表达及其临床意义.方法采用5只成年小鼠内耳组织提取总RNA,逆转录后获得小鼠内耳细胞cDNA,根据RTN1和RTN4基因编码区序列设计的引物进行PCR扩增,通过PCR产物分析和DNA测序确定RTN1和RTN4是否在小鼠内耳细胞表达.第三部分:小鼠螺旋神经节细胞电压依赖性钙通道亚单位分析目的分析小鼠螺旋神经节细胞电压依赖性钙通道亚单位的类型.方法手术分离新生小鼠的耳蜗螺旋神经节细胞进行培养,24小时后提取RNA.逆转录后获得螺旋神经节细胞cDNA,根据电压依赖性钙通道7种亚单位序列设计的引物进行PCR扩增,通过PCR结果分析和DNA测序确定螺旋神经节细胞表达的亚单位类型.
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