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本论文主要针对黄海生态系统关键种鲲鱼(Engraulisjaponicus)繁殖生物学中一些尚不十分明了的问题进行研究。首先对鱼类繁殖生物学的相关问题进行了综述,然后对黄海鲲鱼卵巢的组织发育进行了研究,最后对鲲鱼的批生殖力进行了评估。主要研究内容与研究结果如下。
1.采用组织切片并结合常规目测对黄海鳀鱼卵巢的组织发育特征进行了研究。描述了鳀鱼卵巢各发育期的外观形态和各时相卵母细胞的组织发育特征,对不同发育期卵巢内卵母细胞的时相组成、卵径分布以及卵巢两叶发育特征的异同进行了分析。结果表明:
(1)鳀鱼卵母细胞发育不同步。Ⅱ期卵巢由1~3时相卵母细胞组成,2时相卵母细胞在数量上占优势(66.3%):Ⅲ、Ⅳ、Ⅵ期卵巢均由1~4时相卵母细胞组成,其主要区别在于4时相卵母细胞所占比例不同,其中Ⅳ期卵巢中最高(34.8%),Ⅲ期次之(28.6%),Ⅵ期最低(17.8%);Ⅴ期卵巢由1~5时相卵母细胞组成,已发育成熟的5时相卵母细胞(已水合)所占比例最高(29.8%)。卵巢由Ⅲ期到Ⅴ期的发育过程中,主要是3、4时相卵母细胞向4、5时相的发育,1、2时相细胞所占比例基本不变。
(2)卵母细胞的粒径分布呈明显的峰、谷特征,这与以前对该问题的“浅锯齿状分布”认知有明显不同。Ⅲ、Ⅵ期卵巢内的卵径(长径)呈单峰分布,众数粒径组均为0.5-0.6mm:Ⅳ、Ⅴ期卵巢呈双峰分布,众数粒径组分别为0.2-0.3mm、0.7-0.8mm和0.5-0.6mm、1.1-1.2mm;Ⅴ期卵巢两个优势卵母细胞群在粒径分布上彼此分离,粒径较大的群内均为水合卵母细胞,呈现出明显的分批产卵特征。
(3)鲲鱼卵巢左、右两叶大小差异显著,叶大、右叶小,右/左重量比值为0.71,95%置信区间为(0.67,0.75);卵巢叶间和叶内各部位间卵母细胞的发育状态无显著差异(p>0.05)。
2.在国内首次采用水合卵母细胞法(以水合卵母细胞的数量进行生殖力评估的方法),利用Ⅴ期卵巢对黄海鲲鱼的批生殖力进行了研究;同时采用传统的卵径法(以卵径大于某一起算标准的卵母细胞的数量进行生殖力评估的方法,本研究的起算卵径为0.6mm),分别利用Ⅳ期和Ⅴ期卵巢对进行鲤鱼的生殖力进行了近似估测,以便与前人的研究结果进行比较。主要结果如下:
(1)水合卵母细胞法估算的鳀鱼平均批生殖力为3507.4粒,平均相对批生殖力为195.2粒/g;采用卵径法,利用相同样品(14个Ⅴ期卵巢)估算的鳀鱼平均批生殖力值为4188.1粒,平均相对批生殖力为233.1粒/g。配对t检验显示两方法的评估结果差异极显著(p<0.001),卵径法估算的平均相对批生殖力比卵母细胞法平均高37.9粒/g,95%CI为(23.7,52.2)粒/g。Peaerson检验显示,两种方法评估的相对批生殖力与全长、纯重均无显著的相关性(R:0.218~0.334,P:0.244~0.455)。以上结果表明,对已发育至Ⅴ期的鳀鱼,已不适宜采用卵径法对其批生殖力进行评估;国内以前有关黄海鲤鱼生殖力的研究结果要高于鳀鱼的批生殖力,但应远低于鳀鱼的总生殖力。
(2)采用卵径法,利用Ⅳ期卵巢估算的黄海鳀鱼平均批生殖力为7600.3粒,平均相对批生殖力Fw(OⅣ)为415.2粒/g。对Fw(OⅣ)与Fw(H)进行t检验,结果差异极显著(p<0.01),说明以0.6mm为起算标准时,卵径法对批生殖力的评估结果明显高于水合卵母细胞法的评估结果。Peaerson检验显示,此法估算的鳀鱼相对批生殖力与全长(R=0.157,P=0.101)、纯重(R=0.059,P=0.538)均无显著的相关性。以上结果表明,水合卵母细胞法应是鲲鱼批生殖力研究的首选:当确需利用Ⅳ期卵巢以卵径法进行研究时,需进一步研究确定更加准确的起算卵径标准。
(3)采用卵径法,利用Ⅳ期卵巢样品,分别对山东半岛南北两侧不同产卵场鲤鱼的批生殖力进行了估算。结果显示,烟台外海产卵场鲤鱼的平均批生殖力为9931.2粒,平均相对批生殖力为511.9粒/g;青岛外海产卵场鲲鱼的平均批生殖力为6117.1粒,平均相对批生殖力为362.2粒/g。两独立样本t检验显示,两产卵场鳀鱼的相对批生殖力差异极显著(p<0.001);原因尚待进一步研究。