【摘 要】
：
胸腺肽β4（Tβ4）是β胸腺肽家族的一员,由43个氨基酸残基组成,N-末端Ser残基位点被乙酰化修饰,具有多重生物学功能,在组织再生、重塑、创伤愈合、维持肌动蛋白平衡、肿瘤发病与转移、细胞凋亡、炎症、血管生成、毛囊发育等生理、病理过程中扮演着极为重要的角色。美国雷根内克斯公司化学合成出Tβ4对其作为治疗用药的研究已经进入Ⅱ期临床阶段。由于生物提取和化学合成的局限性,人们尝试生物制备Tβ4,但生物合
论文部分内容阅读
胸腺肽β4（Tβ4）是β胸腺肽家族的一员,由43个氨基酸残基组成,N-末端Ser残基位点被乙酰化修饰,具有多重生物学功能,在组织再生、重塑、创伤愈合、维持肌动蛋白平衡、肿瘤发病与转移、细胞凋亡、炎症、血管生成、毛囊发育等生理、病理过程中扮演着极为重要的角色。美国雷根内克斯公司化学合成出Tβ4对其作为治疗用药的研究已经进入Ⅱ期临床阶段。由于生物提取和化学合成的局限性,人们尝试生物制备Tβ4,但生物合成存在两大难点,乙酰化修饰和小分子多肽的表达,因此未能获得与天然结构一致的Tβ4。本研究中,将其编码基因融合在一种分子量极小的Spl DnaX Intein（136个氨基酸残基,来源于Spirulina platensis）的N端,同时在Intein的C端添加His标签,构建融合表达载体pET-Tβ4-Intein,将其与乙酰化酶表达载体pACYC-nat共转至BL21（DE3）中,得到N-末端乙酰化修饰的Tβ4-intein融合蛋白。由于该Intein的C末端残基Asn突变为残基Ala,阻断了剪接反应,在体外用巯基乙醇诱导融合蛋白发生N端切割,获得具有N-末端乙酰化修饰的Tβ4。目的蛋白经过疏水,反相和阴离子交换层析进一步纯化,经过RP-HPLC分析,最后用Q-TOFMS和Q-TOF MS/MS质谱鉴定其精确分子量和乙酰化修饰位点,最终获得了与天然结构一致的Tβ4。同时利用该方法制备了Tβ4的三个突变体。此方法重复性高,得率较好,平均每升培养液中能获得纯度超过96.7%的目的蛋白61.79mg,具有应用前景。在体外Tβ4及其三个突变体均可与肌动蛋白结合。本工作为进一步研究Tβ4的功能和应用奠定了基础。
其他文献
国家公园社区居民的环境责任行为对自然资源保护和可持续发展具有重要意义。文章构建国家公园情境下社区居民环境责任行为意向的计划行为理论拓展模型,选取云南普达措国家公园为案例地,基于503份社区居民有效问卷运用结构方程模型验证理论假设,分析国家公园社区居民环境责任行为意向的影响因素及内在机理。研究结果显示:行为态度、主观规范、敬畏情绪和地方依恋正向影响环境责任行为意向;理性因素（行为态度、主观规范）和情
由于温室效应不断推高全球气温,植物不可避免的要受到高温的影响,温度逐渐成为影响植物生理过程的重要因素之一。所以,科学研究目前亟待解决的关键问题是增强植物的耐热性。MicroRNA （miRNA）是一类由内源基因编码的长度约为22个核苷酸的非编码单链小RNA分子,它在转录后水平调节靶基因表达。MicroRNA作为基因表达调控的新成员正不断受到科学家们的重视,它能够在转录后水平对基因表达实施准确的调控
加强党员教育管理,是党的建设基础性、根本性、经常性任务,是马克思主义政党的鲜明特征。国家能源集团谏壁发电厂探索党员教育管理新路径,强化党员"积分亮绩"管理,抓实基础环节,落实基本要求,坚持党员教育、管理、监督、服务相结合,推动形成科学规范的工作链条,努力建设信念坚定、政治可靠、素质优良、纪律严明、作用突出的党员队伍,激发基层党组织的生机与活力。
为有效解决传统隧道衬砌工艺中衬砌拱顶脱空、浇筑混凝土厚度和强度不足等二次衬砌质量通病，提高衬砌整体性并提升二衬标准化施工水平，文章针对景文高速耙齿岩隧道项目工程，采用了新型可带模注浆的衬砌台车以替代传统的混凝土浇筑方式，并对台车模板和分流系统进行综合改造设计以更好的适配耙齿岩隧道衬砌工程的施工特点，在此基础上提出了完整的逐窗入模和浇筑混凝土施工流程。此外，针对带模注浆施工前的特殊情况提出了局部超前
项目点击近年来,温江区积极适应党员队伍多样化、差异化特点,按照局部试点、总结经验、全面推广的工作思路,分类探索社区流入党员和离退休人员党员管理办法,不断增强党员教育管理针对性和实效性,推动党员教育管理工作水平整体提升。
特征选择是数据挖掘和模式识别领域的研究热点之一。为了提高对高维数据所建模型的泛化推广能力,有必要去除无关、冗余特征。从m个特征中选取P（P≤m）个最优特征子集理论上有2m种可能,已知这是一个完全多项式非确定性问题,在m较大时无法穷举。本文针对现有多数非穷举特征筛选方法易陷入局部最优的弊端,充分利用支持向量机的优点,发展了一种新的高维特征非线性快速筛选方法。对于分类问题,针对现有特征选择算法缺少通用
SDG26（SET domain group26）是一个组蛋白甲基转移酶基因。拟南芥SDG26基因功能缺失突变体sdg26具有莲座叶数量增多,叶片肥大,茎杆增粗,分枝增加,晚花和生长周期延长等表型。本研究以sdg26突变体为研究对象,观察其细胞学特征,对SDG26基因起始密码子上游序列进行了生物信息学分析。在此基础上对突变体sdg26在干旱和盐胁迫下,SOD、MDA、可溶性糖和脯氨酸含量等生理生化
细胞自噬是植物体内极其重要的功能之一。拟南芥细胞自噬相关基因的研究对深入了解细胞自噬具有重要意义。Atg8是细胞自噬的一个重要蛋白,Atg8融合GFP是检测植物中细胞自噬的重要途径。在前期的研究中,我们以AtAtg8e为诱饵蛋白,通过酵母双杂交实验,从拟南芥cDNA文库筛选得到了35个与AtAtg8e互作的蛋白。本研究采用荧光素互补技术（LCI）进一步探讨这些蛋白在烟草中与AtAtg8的互作关系。
生物的捕食与被捕食行为是生态系统中的普遍现象.自上世纪Volterra和Lotka研究的捕食与被捕食模型开始,捕食-被捕食模型就一直被广泛关注.许多相关方面的研究人员在原有模型的基础上,考虑了时滞、功能反应、种群年龄阶段结构和亲代抚育等诸多因素,并且对模型的稳定性、持久性和耗散性等性质进行详细分析论述,得到许多重要结果.但这些研究大多是基于连续型模型的.在实际问题中,对一些世代不重迭的种群的繁殖规
“双减”背景下,为了更好地提升学生的语文素养,作业设计需提高精准度,让目标与任务一一对应;需拓宽灵活度,让任务与活动步步转化;需增强评价贴合度,让活动与结果层层进阶。