慢性乙型病毒性肝炎肝郁脾虚和脾胃湿热证候差异的蛋白组学研究

来源 :成都中医药大学 | 被引量 : 6次 | 上传用户:wd707800502
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目的:采用同位素标记相对和绝对定量(isobaric tags for relative and absolute quantitation, iTRAQ)联合液相色谱串联质谱(liquidchromatography tandem mass spectrometer, LC-MS/MS)技术对慢性乙型病毒性肝炎肝郁脾虚证、脾胃湿热证患者与健康志愿者的血清样本进行蛋白相对定量检测以分析、鉴定两证型之间的差异性表达蛋白并对其进行生物学分析,以便从分子生物学层面探讨两证的内在联系与区别、发现两证之间可能的生物标志物,为中医证候本质的现代化研究提供依据。方法:选取四川大学华西医院门诊及住院部符合西医、中医诊断标准及排除标准的慢性乙型病毒性肝炎肝郁脾虚证和脾胃湿热证患者及来自成都市的健康志愿者作为研究对象。抽取患者及健康志愿者的血液,对血液进行离心并制备血清后对样品进行同位素标记相对和绝对定量(isobaric tags for relative and absolute quantitation, iTRAQ)联合液相色谱串联质谱(liquidchromatography tandem mass spectrometer, LC-MS/MS)检测,筛选证候间差异表达蛋白并对其进行生物学分析。结果:(1)肝郁脾虚组和脾胃湿热组差异表达蛋白共61个,其中上调表达的16个,下调表达的45个。(2)肝郁脾虚组和脾胃湿热组间差异性蛋白的GO显著性分析共得到生物进程条目35个,细胞成分条目16个,分子功能条目26个。(3)证候间差异蛋白Pathwa; y显著性富集分析显示两证之间差异蛋白涉及脂肪酸代谢、视黄醇代谢、精脯氨酸代谢、丙-谷-天冬氨酸代谢、氧化磷酸化代谢与肝酶P-450相关的毒物和共栖代谢通路。(4)经过String分析YWHAH、RhoC、RhoA、ATP5A1、 ATP5B、CDH1蛋白处于差异蛋白功能网络交叉点。结论:1、发现了肝郁脾虚与脾胃湿热证候间差异表达蛋白谱。2、处于差异蛋白蛋白功能网图中交点位置的YWHAH、RhoA、RhoC、ATP5Al、ATP5B、CDH1蛋白可能是证候间差异的生物学基础。
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