效应因子在病原菌侵染宿主的过程中发挥着至关重要的作用。稻瘟病菌是引起水稻重要病害稻瘟病的病原真菌,同时也是研究病原真菌与植物互作理想的模式生物。在稻瘟病菌中研究效应因子功能不但能加深对稻瘟病菌致病机制的理解,还可为稻瘟病的生态防控提供理论依据。在卵菌中,RXLR基序介导效应因子跨膜转运至植物细胞质的过程。已知稻瘟病菌基因组编码许多类似RXLR基序(LXAR基序)的候选效应因子。为了研究这些包含LXAR基序候选效应因子(M.oryzae LXAR-like effectors,MoLLEs)的功能,本实验室在前期工作中,利用烟草瞬时表达体系,筛选能抑制BAX诱导的细胞凋亡或者自身能诱导细胞凋亡的MoLLE,并成功筛选到了3个候选的效应蛋白,分别命名为MoLLE1、MoLLE2和MoLLE3。其中MoLLE1-NS能抑制BAX引起的HR;与MoLLE1正好相反,MoLLE2-NS能够诱导烟草的HR反应,而MoLLE2-FL则可以抑制BAX产生的HR反应;MoLLE3-NS能够抑制BAX诱导的HR反应。此外,我们还对MoLLE基因进行敲除,并获得MoLLE1和MoLLE3的敲除突变体△Molle1 和 △Molle3。在此基础上,为进一步研究MoLLE基因的功能,本研究首先对△Molle1和△Molle3突变体进行互补验证,并利用RNAi沉默的方法构建了MoLLE2-RNAi突变体。然后通过分析突变体的生长速率、产孢量和致病性,探讨稻瘟病菌MoLLE基因在侵染致病过程中的功能。研究发现,与野生型相比,MoLLE1和MoLLE3敲除突变体以及MoLLE2-RAi突变体的生长速率及菌落形态没有差异,但MoLLE1敲除突变体对细胞壁抑制剂刚果红敏感。在产孢方面,敲除或者沉默这些基因都能引起产孢量下降,说明MoLLEs可能参与稻瘟病菌的产孢过程。此外,敲除突变体对感病水稻的致病能力也下降。因此,MoLLEs可能在稻瘟病菌的致病过程中扮演重要角色。另一方面,MoLLEs基因如何影响分生孢子的形成以及该基因是否作用于其它生理过程,有待进一步研究。