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本试验于2006-2008年在河南农业大学组织培养实验室进行。在豫农矮化砧木1号快繁体系的建立过程中,以其带芽幼嫩枝条为外植体,对外植体取材时期、灭菌方法、各个培养阶段培养基的成分、增殖苗褐化现象的抑制等方面进行了系统的研究。研究结果如下:
1.外植体取材时期的选择。通过不同时期采集新梢进行培养,结果表明:5月上旬取材比6、7、8、10月份能显著提高外植体的萌芽率,同时降低了外植体的污染率。因此,5月上旬为最佳取材时期为。
2.无菌体系的建立。不同灭菌方法对外植体进行灭菌,结果表明:用75%乙醇+不同浓度的消毒片(有效氯50mg·g-1)浸液混合使用的灭菌效果明显好于75%乙醇+不同浓度的NaCIO(次氯酸钠)、75%乙醇+不同浓度的HgCl2(升汞);不同浓度的消毒片灭菌处理以1.5g·L-1消毒片灭菌20min效果最好。
3.初代培养基的筛选。将灭过菌的带芽枝条茎段接种于不同的初代培养基中,结果表明:适合茎段萌芽的最适初代培养基为MS+1.6 mg·L-1BA+0.4 mg·L-1IBA。
4.增殖培养基的筛选。将初代萌芽苗直接接种到附加不同浓度IBA及BA的MS培养基中进行培养,结果表明:最佳增殖培养基为MS+1.5 mg·L-1BA+0.3 mg·L-1IBA。
5.抑制褐化现象的有效措施的筛选。将增殖苗接种到含有不同浓度的抗氧化剂或吸附剂的培养基中,结果表明:PVP吸附剂能够显著降低苗木的褐化率,其中1000mg·L-1、1500mg·L-1均能有效降低苗木褐化率,以1000 mg·L-1PVP为最经济有效的浓度。
6.生根培养,将长势良好的增殖苗接种到附加不同生长素的1/2MS培养基中,结果表明在本试验设定的研究范围内,不同生长素处理均不能使增殖苗生根。
本研究旨在建立桃豫农矮化砧木1号快速繁殖技术体系,以期为解决桃豫农矮化砧木1号的繁殖问题提供理论和技术依据。