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目的探讨硫化氢（H2S）后处理对缺血-再灌注大鼠心肌的保护作用及可能机制。方法24只雄性SD大鼠随机分为假手术（Sham）组、缺血-再灌注（IR）组、H2S后处理（H2S）组，每组8只。以硫氢化钠（NaHS）作为外源性H2S供体。Sham组：左冠状动脉前降支（LAD）下挂线，不结扎，持续观察4.5h；IR组：结扎LAD0.5h，再灌注4h，于再灌注前5min经腹腔注射生理盐水1ml；H2S组：手术操作同IR组，于再灌注前5min给予NaHS（160μmol/kg），用生理盐水稀释至1ml后经腹腔注射。再灌注结束后，取左室标本备用。采用TUNEL法检测心肌细胞凋亡指数（AI），RT-PCR法检测心肌组织HIF-1α和VEGF mRNA表达，Western blot检测HIF-1α和VEGF的蛋白表达。原代培养的SD大鼠乳鼠心肌细胞随机分为5组：正常对照（CON）组,缺氧-复氧（HR）组,二甲基亚砜（DMSO）组, H2S后处理（H2S）组，LY294002+H2S后处理（LY+H2S）组。以硫氢化钠（NaHS）作为外源性H2S供体。CON组：将心肌细胞放入37℃含5%CO2培养箱中孵育4h。HR组：将心肌细胞放入37℃含95%N2、5%CO2培养箱中，用缺氧液孵育2h，再换复氧液在含5%CO2培养箱中孵育2h。DMSO组：缺氧干预2h后，即给予含0.02%DMSO复氧液孵育30min，换无DMSO的复氧液孵育1.5h。H2S组：缺氧干预2h后，给予含NaHS（终浓度为40μmol/L）复氧液孵育30min，再用无NaHS复氧液孵育1.5h。LY+H2S组：缺氧干预2h后，给予含LY294002（终浓度为15μmol/L）和NaHS（终浓度为40μmol/L）复氧液孵育30min，再用无二者的复氧液孵育1.5h。分别收集缺氧前、缺氧2h和复氧2h的细胞培养液和心肌细胞备用。MTT法检测心肌细胞存活率；测定培养液中CK和LDH活性；流式细胞学检测心肌细胞凋亡率；Western blot检测HIF-1α、p-Akt与Akt的蛋白表达。结果再灌注末，TUNEL法结果提示：Sham组、IR组、H2S组心肌组织AI分别为（5.04±0.54）%、（36.39±0.69）%、（17.52±1.02）%。与IR组比较，H2S组AI显著降低（P<0.01）。RT-PCR结果提示：与IR组比较，H2S组心肌组织HIF-1α和VEGF mRNA表达水平明显增加[（99.67±1.53）%，（100.67±3.51）%，均为P＜0.01]。Western blot结果提示：与IR组比较，H2S组大鼠心肌组织HIF-1α和VEGF蛋白表达水平亦显著增加[（78.00±17.35）%，（137.67±15.50）%，分别为P＜0.05和P＜0.01]。复氧末，MTT结果提示：CON组，HR组，DMSO组，H2S组和LY+H2S组心肌细胞存活率分别为（95.24±1.32）%，（62.03±1.29）%，（60.86±2.12）%，（71.55±1.46）%和（63.65±2.01）%，H2S组心肌细胞存活率较HR组和LY+H2S组明显升高（均为P＜0.01）。流式细胞学结果提示：CON组，HR组，DMSO组，H2S组和LY+H2S组心肌细胞凋亡率分别为（6.98±1.33）%，（17.38±2.04）%，（17.48±2.47）%，（10.37±1.51）%和（15.17±1.56）%，H2S组心肌细胞凋亡率较HR组和LY+H2S组显著降低（均为P＜0.01）。同时，H2S组培养液中CK与LDH活性较HR组和LY+H2S组明显降低[（244.99±21.38）U/L，（371.64±18.62）U/L，均为P＜0.01]。Western blot结果提示：H2S组心肌细胞中HIF-1α和p-Akt蛋白表达较HR组和LY+H2S组显著升高[（63.93±4.64）%，（62.59±2.11）%，分别为P＜0.05和P＜0.01]。结论H2S后处理对大鼠IR心肌具有保护作用；其机制可能是H2S后处理通过激活PI3K/Akt信号途径上调HIF-1α蛋白表达，进而抑制心肌细胞凋亡，缓解MIRI。