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I群禽腺病毒(FAd V-Ⅰ)属于禽腺病毒属,分为A~E 5个种,1~7、8a、8b、9~11共12个血清型,主要引起包含体肝炎(IBH)、心包积水-肝炎综合征(HHS)等疾病。近年来,IBH和HHS在我国的发病率呈上升趋势,该病主要侵害3~7周龄肉鸡,其中血清4型可造成严重心包积水,死亡率高达30%~80%。所有血清型均可引发IBH,特征为肝脏肿大,呈现不同程度的出血点和出血斑,死亡率可达10%~30%,给养禽业造成巨大的经济损失。随着养殖业集约化生产不断扩大,特别是病毒性传染病已成为制约养殖业进一步发展的重要因素。而卵黄抗体是禽类通过特定的抗原免疫后聚集于卵黄中的特异性抗体,且卵黄抗体以特异性强、成本低、安全和高效的优势,已普遍应用于家禽病毒性疾病的预防与治疗。本研究从临床疑似感染样品中进行Ⅰ群禽腺病毒的分离鉴定,并对分离株进行序列比对分析,选择优势血清型毒株制备油乳剂灭活苗及卵黄抗体,并进行SPF鸡预防保护和攻毒保护试验,旨在为Ⅰ群禽腺病毒的防控提供应用价值。1.Ⅰ群禽腺病毒的分离鉴定本研究于2020~2021年从山东及周边省份采集疑似Ⅰ群禽腺病毒感染病料,用鸡胚肝细胞进行病毒分离,利用PCR方法进行病毒检测。结果共分离出9株Ⅰ群禽腺病毒,对分离株Hexon基因测序,并对测序结果进行同源性比对及遗传进化分析,分离株分别为3株血清4型、4株血清8b型和2株血清11型。挑选优势血清型FAd V-4(SDTA)、FAd V-8b(SDLY)、FAd V-11(SDWF)用鸡胚肝细胞进行种毒的扩增,并进行毒力测定,结果表明TCID50分别为FAd V-4(SDTA):10-6.67/0.1 m L、FAd V-8b(SDLY):10-5.39/0.1 m L、FAd V-11(SDWF):10-6.50/0.1 m L。用FAd V-4(SDTA)、FAd V-8b(SDLY)和FAd V-11(SDWF)分别肌内注射于28日龄SPF鸡进行动物回归试验,结果显示:鸡只出现肝脏肿大,表面有出血点和出血斑,肾脏及胸腺肿大、出血,肾脏肿大;其中FAd V-4(SDTA)攻毒鸡只90%以上可见心包积水,呈淡黄色清亮液体,个别呈胶冻样。2.Ⅰ群禽腺病毒三价灭活苗的制备选取优势血清型FAd V-4(SDTA)、FAd V-8b(SDLY)、FAd V-11(SDWF)按1:1:1比例制备三价抗原液,经甲醛灭活后与无菌吐温-80(Tween-80)按96:4的比例混合,作为制备疫苗的水相,按照油水比2:1制备Ⅰ群禽腺病毒三价灭活苗。3.Ⅰ群禽腺病毒三价卵黄抗体的制备及应用将制备的灭活苗对产蛋鸡进行四次免疫,免疫间隔14 d,在每次免疫后14 d收集鸡蛋,用辛酸法进行卵黄抗体的提取,并进行卵黄抗体预防保护效果检验及攻毒保护效果检验。预防保护试验中,各组鸡只28日龄分别肌内注射0.5 m L、1.0 m L卵黄抗体,24 h后分别用FAd V-4(TCID50=10-4.67/0.1m L)、FAd V-8b(TCID50=10-3.39/0.1m L)、FAd V-11(TCID50=10-4.50/0.1m L)按0.5 m L/只进行攻毒。结果显示:1.0 m L/只的卵黄抗体注射剂量对FAd V-4、FAd V-8b和FAd V-11的保护率为100%;0.5 m L/只的注射剂量对FAd V-8b和FAd V-11的保护率为100%;0.5 m L/只的注射剂量对FAd V-4的保护率为90%。有良好的保护效果。攻毒保护试验中,各组鸡只28日龄攻毒,24 h后分别肌内注射0.5 m L、1.0 m L卵黄抗体。结果显示:0.5 m L/只、1.0 m L/只的卵黄抗体注射剂量对FAd V-8b、FAd V-11的保护率为100%,有良好的保护效果;0.5m L/只、1.0m L/只的注射剂量对FAd V-4的保护率分别为80%、90%,有较好的保护效果。对预防保护试验和攻毒保护试验各组鸡只于攻毒后1、3、5、7、10 d进行肛拭子排毒检测,结果表明:FAd V-4、FAd V-8b和FAd V-11攻毒对照组排毒时间久,阳性率高。试验组0.5 m L/只、1 m L/只的卵黄抗体注射量,使FAd V-4、FAd V-8b和FAd V-11的排毒率显著降低。综上所述,本研究制备的Ⅰ群禽腺病毒三价卵黄抗体对FAd V-4、FAd V-8b和FAd V-11具有良好的免保护效果,且对攻毒SPF鸡具有较好的疗效,能对Ⅰ群禽腺病毒的感染起到良好预防和治疗作用,为该病毒的防控提供一种安全、高效的新型生物制品。