沉默Fra-1基因对人胃癌MGC-803细胞侵袭与迁移的影响及其机制

来源 :南华大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:qiuyu19860916
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目的:研究沉默Fra-1基因对胃癌MGC-803细胞侵袭及迁移的影响及其机制方法:应用RNA干扰技术沉默Fra-1基因,用RT-PCR、Western blot法检测Erk、uPA、Fra-1、MMP-9、uPAR、TIMP-3mRNA以及蛋白的表达水平的改变,用Trans-well小室法和划痕试验检测细胞侵袭力和迁移力变化。结果:1.前期实验已经证实SiRNA转染胃癌MGC-803细胞后能够沉默Fra-1因子的表达2.Trans-well小室法和划痕试验检测结果显示,沉默Fra-1因子细胞侵袭力和迁移力较阴性对照组、转染试剂对照组及空白细胞组明显降低。3.RT-PCR结果显示沉默Fra-1因子后MGC-803细胞ERK,uPA、MMP-9mRNA表达下调(P<0.05),TIMP-3mRNA表达上调(P<0.05),uPAR mRNA表达无明显变化(P>0.05)。4.Western-blot结果显示沉默Fra-1因子后MGC-803细胞后ERK、uPA、MMP-9蛋白表达下调(P<0.05),TIMP-3蛋白表达上调(P<0.05), uPAR蛋白表达无明显变化(P>0.05)。结论:1.沉默Fra-1基因能显著抑制MGC-803细胞侵袭与迁移;2.沉默Fra-1基因后胃癌侵袭转移相关因子Erk、uPA、MMP-9mRNA和蛋白表达水平均下调,猜测Fra-1基因在ERK/Fra-1/uPA/MMPs通路中可能是调控胃癌侵袭转移的关键靶基因。
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