【摘 要】
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本文主要研究了用生物酶法从麦冬中提取麦冬寡糖和麦冬皂苷的工艺条件,并分别对麦冬寡糖和麦冬皂苷进行了分离纯化,初步研究了麦冬寡糖的组成、相对分子质量和性质。研究了产
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本文主要研究了用生物酶法从麦冬中提取麦冬寡糖和麦冬皂苷的工艺条件,并分别对麦冬寡糖和麦冬皂苷进行了分离纯化,初步研究了麦冬寡糖的组成、相对分子质量和性质。研究了产酶发酵条件,确定了Absidia sp.084s菌株为最佳产酶微生物;最佳产酶发酵条件为:以麦冬浸出液作为产酶诱导物,液体发酵培养基组成为80mL 5°麦芽汁加20mL麦冬浸出液,菌培养温度为30℃,培养时间6d。优化了生物酶法提取麦冬寡糖和麦冬皂苷的工艺条件。最佳酶反应条件为:麦冬粉末用4倍体积缓冲液溶胀作为底物,最适酶反应温度为45℃,最适pH为5,反应时间12h。乙醇分离麦冬皂苷和麦冬寡糖的条件是:加入乙醇至醇体积分数达到80%,静置8h。麦冬寡糖被沉淀,经水溶过滤得到麦冬寡糖粗品。麦冬皂苷溶解在乙醇中,蒸干得到生物酶法提取的麦冬皂苷粗品。经大孔吸附树脂AB-8和D-296脱糖脱色,得到纯度较高的麦冬总皂苷,得率为0.28%。比较了几种从麦冬寡糖粗品中去除蛋白质的方法,结果显示,采用Sevage-TCA联用法去除麦冬寡糖蛋白质,效果最好,蛋白质去除率为81.18%,多糖损失率为8.39%。麦冬寡糖经SephadexG-100柱层析,得到三个组分,分别命名为OP-Ⅰ、OP-Ⅱ、OP-Ⅲ,测定其相对分子质量分别为约39kDa、7kDa、2kDa。通过HPLC法分析OP-Ⅰ、OP-Ⅱ和OP-Ⅲ的单糖构成,OP-Ⅰ、OP-Ⅱ的单糖组成为果糖,OP-Ⅲ的单糖组成为葡萄糖和果糖。
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