耐甲氧西林金黄色葡萄球菌分型及流行现状

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背景和目的耐甲氧西林葡萄球菌(Methicilin-resistant Staphylococcus aureus, MRSA)是临床常见的重要病原菌,在世界范围内广泛蔓延,甚至引起感染的暴发流行。同时,MRSA具有很强的耐药性,给临床的治疗带来极大的困难。了解医院内MRSA的多态性,可以为临床合理、有效地使用抗生素和控制耐药基因在种群间的传播提供帮助。本文研究目的是明确本地区MRSA的基因型别,探讨MRSA菌株流行变化趋势及进化特点,为本地区MRSA的防治提供科学依据。方法依据VITEK-Compact全自动细菌鉴定/药敏仪对177株金黄色葡萄球菌的药物敏感结果,初步筛选出MRSA,再用PCR方法对MRSA特异性基因(甲氧西林耐药基因)mecA检测,以确证MRSA.再用PCR技术对MRSA进行葡萄球菌盒式染色体mec基因、葡萄球菌A蛋白基因、luk基因毒力测定,并开展多点序列分型,与国际上MRSA的流行型别进行比较,来分析进化关系。并结合流行病学资料予以分析。结果1.MRSA确证:90株MRSA对头孢西丁、苯唑西林均表现耐药,且Meca基因(MecA147、MecAP4-P7)测定后均呈阳性,确证此90株为MRSA。2.MRSA基因分型:成功分型86株,结果报告如下2.1葡萄球菌A蛋白(spa)基因多态性分析:86株MRSA共发现13个spa型,以t311型为主,42株;其次为t6418型,10株。2.2MLST分型:86株MRSA共发现9个ST型,以ST5为主,51株;其次为ST239,14株;ST59,10株;ST1,3株;ST88,4株;ST630、ST573、ST965、ST1921各1株。经eBURST软件分析它们属于4个群(group1、group6、group8、group12)和8种克隆复合体(CC1、CC5、CC630、CC20、CC59、CC88、CC239、CC573。)2.3SCCmec基因分型:分离出的MRSA以SCCmec Ⅱ型为主,53株(61.6%);其次为SCCmec Ⅲ型,19株(22%);SCCmecⅠ型7株;SCCmec Ⅳ型5株(社区相关性MRSA);未明确型的有2株。86份菌株中以group1为主(71株,82.6%),其中第一流行克隆为SCCmec-Ⅱ-ST5-t311-CC5(41株,47.7%),第二位的流行克隆为SCCmec-Ⅲ-ST239-t030/t037-CC239(11株,12.8%)。3.杀细胞毒素(PVL):其中90株MRSA中有6株,全部为SCCmec-Ⅲ-ST59-t6418-CC59克隆,阳性率为6.67%。结论:2009-2012年间本地区分离自无菌体液的金黄色葡萄球菌中MRSA的检出率为50.9%,SCCmec-Ⅱ-ST5-t311为本地区当前流行菌株;CA-MRSA菌株的出现,提示MRSA菌株有由医院向社区播散的趋势;此外,对新发展了单位点变体的菌株(SCCmec-Ⅰ-ST1921-t164-CC20和SCCmec-⒊-ST965-t062-CC5),应提高重视。
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