目 的：代谢综合征(metabolic syndrome, MS)是一组以高血压、高血糖、血脂异常及肥胖等聚集发病、严重影响机体健康的临床征候群,是一组在代谢上相互关联的危险因素的组合,高血压、高血糖、血脂异常及肥胖等直接导致动脉粥样硬化性心血管疾病的发生,亦增加了2型糖尿病的发病风险。本实验研究拟通过复制脾肾阳虚证MS大鼠模型,将中医辨证理论与代谢组学研究方法相结合,比较空白对照组和脾肾阳虚证MS模型组,对两组血清标本进行比较、分析,寻找脾肾阳虚证MS病变的特征性代谢物,通过观察代谢物变化与生理、病理的相关联系,探寻脾肾阳虚证MS病变的分子机制,从而进一步揭示脾肾阳虚证MS本质。材料与方法：1.脾肾阳虚证MS大鼠模型复制洁净级Wistar健康雄性大鼠36只,体重(220±20)g,实验前大鼠适应性喂养—周,自由饮水,无不良反应、进食、饮水和活动正常者纳入实验。按体重随机分成空白对照组(n=8),每日进食普通标准大鼠饲料,饮用自来水,自由进食、进水。模型组(n=28),第1-4周,按10 mg/(kg·d)剂量给予大鼠0.1%丙基硫氧嘧啶灌胃；第5-18周,在脾肾阳虚证基础上,采用高糖高脂饲料持续喂养联合小剂量多次注射STZ的方法,复制MS大鼠模型；整个造模周期为18周。2.代谢组学研究随机选取造模成功的脾肾阳虚证MS大鼠8只与空白对照组大鼠8只,进行代谢组学的研究。使用美国Agilent公司的气相色谱-飞行时间质谱联用仪(GC-TOF-MS),使用SIMCA软件(V14, Umetrics AB, Umea, Sweden)对归一化后的数据进行模式识别多变量分析,主成分分析使用UV格式化(UV Variable Scaling)处理的数据标度换算方式。对数据进行自动建模分析。然后对模型进行正交矫正偏最小二乘法判别分析(OPLS-DA),最大化地凸显模型内部与预测主成分(Predictive component)相关的差异。OPLS-DA使用Par格式化(Par Scaling)处理的数据标度换算方式,对第一,二主成分进行建模分析。最后通过OPLS-DA分析过滤掉了不相关的正交信号,因而获得的差异性代谢物更加可靠。结果：1.脾肾阳虚证MS大鼠模型复制：与空白对照组大鼠相比,模型组大鼠从灌胃给药开始,表现为进食、水量减少,1周后出现多尿,个别大鼠体重下降,4周后活动减少,懒动喜扎堆,大便时软时溏,肛周有污物,个别有脱肛现象,气味浓重,精神萎靡不振,倦怠乏力,体毛光泽度逐渐减退,牙齿变黄。造模6周后模型组大鼠体重与空白对照组相比明显减轻,两组之间存在统计学差异(P<0.01),其中第8周无统计学意义(P>0.05)。造模6周后模型组大鼠空腹血糖与空白对照组相比,显著升高,两组之间存在统计学差异(P<0.05),造模12周后两组之间存在显著差异(P<0.01)。造模8周后模型组大鼠甘油三酯与空白对照组相比,显著升高,两组之间存在显著差异(P<0.01)。模型组大鼠高密度脂蛋白与空白对照组相比,造模8周后两组之间存在显著差异(P<0.01)。造模结束后(第18周)模型组大鼠的血清胰岛素与正常对照组相比显著升高,两组之间存在差异,胰岛素敏感指数显著下降,胰岛素抵抗指数显著上升,两组之间存在差异(P<0.01)。造模结束后(第18周)模型组大鼠的血清FT3及FT4水平与空白对照组相比明显减低,两组之间存在差异(P<0.05),而血清TSH水平明显升高,两组之间存在差异(P<0.05)。造模结束后(第18周)模型组大鼠的体温水平与空白对照组相比明显减低,两组之间存在差异(P<0.01)。造模结束时模型组大鼠符合本实验研究拟建立的脾肾阳虚证代谢综合征的评价标准。2.代谢组学研究：通过OPLS-DA能够将模型组大鼠与空白对照组大鼠血清代谢物很好地区分,两组无明显的交叉与重叠。3.潜在生物标记物：寻找到了与脾肾阳虚证代谢综合征大鼠模型相关联的潜在生物标记物,主要为顺丁烯二酸、反丁烯二酸、N-乙基马来酸、肉桂酸乙酯、L-半胱氨酸、肌酸、α-酮戊二酸、1,2,4-苯三酚、果酸、L-苯丙氨酸、木糖醇、β-甘油磷酸钠、核糖醇、葡萄糖-1-磷酸、龙胆酸、4-硝基苯基磷酸酯、N-氨甲酰谷氨酸、N-乙酰-D半乳糖胺、尿酸、N-乙酸-β-D-甘露糖胺,上述物质的集合共同构成了脾肾阳虚证代谢综合征大鼠模型的代谢组学特征。结论：1.通过药物(0.1%丙基硫氧嘧啶、小剂量STZ)干预联合饮食不节(高糖高脂饲料)的造模方法可成功复制出脾。肾阳虚证MS大鼠模型。2.本次实验研究通过代谢组学研究,采用GC-TOFMS技术,证明了脾肾阳虚证MS大鼠的血清代谢物所呈现的图谱不同于健康大鼠的血清代谢物所呈现的图谱。3.发现了顺丁烯二酸、反丁烯二酸、N-乙基马来酸、肉桂酸乙酯、L-半胱氨酸、肌酸、α-酮戊二酸、1,2,4-苯三酚、果酸、L-苯丙氨酸、木糖醇、p-甘油磷酸钠、核糖醇、葡萄糖-1-磷酸、龙胆酸、4-硝基苯基磷酸酯、N-氨甲酰谷氨酸、N-乙酰-D半乳糖胺、尿酸、N-乙酸-β-D-甘露糖胺等脾肾阳虚证MS大鼠模型的潜在生物标志物,揭示了脾肾阳虚证MS的发生与糖类、脂类、蛋白质代谢紊乱有关,而这些体内小分子化合物可能为MS中医证候的物质基础。4.代谢组学研究是深入探讨疾病机理和中医证本质的重要方法。