【摘 要】
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该文描述了一种新颖的、用聚合酶链反应(PCR)联合RNA转录该分子杂交来快速、敏感检测急性淋巴细胞白血病(ALL)微小残留病(MRD)细胞的方法.该方法PCR扩增的是具有个例特异性的
【出 处】
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同济医科大学 华中科技大学同济医学院 华中科技大学
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该文描述了一种新颖的、用聚合酶链反应(PCR)联合RNA转录该分子杂交来快速、敏感检测急性淋巴细胞白血病(ALL)微小残留病(MRD)细胞的方法.该方法PCR扩增的是具有个例特异性的T细胞受体γ链重排基因(TCRγ).在该方法中,克隆性重排扩增自确诊的初期ALL标本的DNA,所用引物分别与V区和J区片段的保守序列一致,其中J区引物加上了T7RNA聚合酶启动子.这一扩增的PCR产物被转录成放射标记的RNA探针;自反义链DNA转录的待测RNA通过类似方法自缓解期标本的TCRr基因合成.待测RNA与探针杂交,RNA杂交体中存在错配的核苷酸序列则被RNaseA消化,若通过聚丙烯酰胺凝胶电泳和放射自显影检测到保护完整的探针表明待测标本中白血病细胞的存在.用ALL细胞系DNA稀释试验表明常可在10<5>个正常细胞中检测出1个肿瘤细胞.一例ALL临床缓解期微小残留病也被成功地检测出来.该实验方法可能提供了一种简单、快速、敏感诊断急淋MRD的方法.与大部分相类似的方法不同,该方法既不需要核苷酸序列分析,也不需要合成肿瘤特异性寡核苷酸探针或引物.
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